申请/专利权人：格莱康美生物医学技术(北京)有限公司

申请日：2022-05-26

公开（公告）日：2024-05-14

公开（公告）号：CN114796089B

主分类号：C12N5/0775

分类号：C12N5/0775;A61K8/99;A61K8/64;A61Q19/08;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/36

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.14#授权;2022.08.16#实质审查的生效;2022.07.29#公开

摘要：本发明公开了一种脐带间充质干细胞外泌体联合红景天多肽在美容养颜中的应用；本发明中将人脐带间充质干细胞外泌体和红景天多肽联合使用，能够更好的激活皮肤组织功能，改善各组织的生理学功能，有效刺激成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的生成，达到快速皮肤修复去除皱纹以及抗衰老的效果。

主权项：1.脐带间充质干细胞外泌体联合红景天多肽在美容养颜中的应用，其特征在于，所述脐带间充质干细胞外泌体的含量为40~80mgml，红景天多肽含量为0.3~0.5mgml；所述红景天多肽通过如下方法制得：（a）将红景天进行粉碎，再将粉碎的红景天和水混合后进行蒸煮，得到混合液；（b）向冷却后的混合液中加入复合酶进行酶解，灭酶，离心，收集上清液；（c）将上清液进行超滤，得到分子量为1000~2000Da的肽段，冷冻干燥，得到红景天多肽粗品；（d）将红景天多肽粗品配置成溶液并采用0.45μm的微孔滤膜进行过滤，得到滤液；再将滤液采用SephadexG-75凝胶柱进行洗脱，洗脱液为蒸馏水，按照出峰顺序收集第三个洗脱峰处的洗脱液，冷冻干燥，即得所述红景天多肽；所述蒸煮温度为105~115℃，时间为10~20min；所述洗脱速度为0.8mlmin；所述酶解温度35~38℃，时间为6~12h，pH值为4~6；所述复合酶由果胶酶、纤维素酶和胰蛋白酶按照2∶（2~3）∶（2~4）组成；所述复合酶添加量为红景天质量的0.8%~2%；所述脐带间充质干细胞外泌体通过如下方法制得：将原代脐带间充质干细胞进行传代培养，收集脐带间充质干细胞的第三代培养上清液；再将上清液以（3000~4000）×g进行离心去除细胞和细胞碎片；向上清液中添加外泌体沉淀试剂进行充分混匀、静置，再以（10000~50000）×g离心20~40min，收集沉淀；采用PBS重悬沉淀后置于纯化柱中，并将纯化柱置于收集管中，将收集管在4℃下以（3000~4000）×g进行离心8~12min，将收集管内溶液进行冷冻干燥，得到所述脐带间充质干细胞外泌体。

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