申请/专利权人:中国农业科学院作物科学研究所
申请日:2023-05-26
公开(公告)日:2024-05-14
公开(公告)号:CN116463348B
主分类号:C12N15/113
分类号:C12N15/113;C12N9/22;C12N15/84;C12Q1/6895;C12N15/55;C12N15/11;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/46
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.05.14#授权;2023.08.08#实质审查的生效;2023.07.21#公开
摘要:本发明公开了利用CRISPRCas9系统编辑玉米ZmCENH3基因的sgRNA及其应用,本发明设计了玉米ZmCENH3基因的sgRNA,其核苷酸序列如SEQIDNO.1~SEQIDNO.2所示;并通过将含有编码所述sgRNA序列的DNA片段和Cas9编码蛋白分别连接到基础载体中,将构建好的载体转化至农杆菌中获得重组农杆菌,并以重组农杆菌介导侵染玉米,获得阳性植株,分别筛选含Cas9和sgRNA的基因片段的阳性植株,并将两者进行杂交,对其杂交后代进行PCR扩增测序,分析玉米植株突变类型,同时筛选得到玉米ZmCENH3基因的突变体植株。
主权项:1.一种编辑玉米ZmCENH3基因的sgRNA组合,其特征在于,所述sgRNA序列包括sgRNA-1和sgRNA-2;所述sgRNA-1的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示,所述sgRNA-2的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;sgRNA-1:5'-GCACCAGGCCGTGAGGAAGA-3',如SEQIDNO.1所示;sgRNA-2:5'-GCCAGGGACTGTAGCGCTGC-3',如SEQIDNO.2所示。
全文数据:
权利要求:
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