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申请/专利权人：苏州近岸蛋白质科技股份有限公司
申请日：2022-02-25
公开（公告）日：2024-05-14
公开（公告）号：CN114480570B
主分类号：C12Q1/48
分类号：C12Q1/48;G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.05.14#授权;2022.05.31#实质审查的生效;2022.05.13#公开
摘要：本发明提供了一种检测mRNA2'‑O‑甲基转移酶活性的方法。具体地，包括以下步骤：（S1）提供5’末端为5’‑三磷酸的单链RNA分子；（S2）对（S1）中的RNA分子进行以下测试反应，所述测试反应包括在阴性测试体系、第一测试体系、第二测试体系中进行反应，其中：阴性测试体系中，不包含酶；第一测试体系中，包含Cap0加帽酶；第二测试体系中，包含Cap0加帽酶和mRNA2'‑O‑甲基转移酶；（S3）检测（S2）中，阴性测试体系、第一测试体系和第二测试体系中的SAH的形成情况，与标准曲线对比，得到SAH的定量结果。本发明的方法安全高、无放射性污染、步骤简单、实验环境要求低、成本低。
主权项：1.一种体外检测mRNA2'-O-甲基转移酶活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：（S1）提供5’末端为5’-三磷酸的单链RNA分子；（S2）对（S1）中的RNA分子分别进行以下测试反应，所述测试反应包括在阴性测试体系、第一测试体系、第二测试体系中反应，反应时间为t，其中：阴性测试体系中，不包含酶；第一测试体系中，包含Cap0加帽酶；第二测试体系中，包含Cap0加帽酶和mRNA2'-O-甲基转移酶；（S3）检测（S2）中，阴性测试体系、第一测试体系和第二测试体系中的SAH的形成情况，与标准曲线或标准值对比，得到SAH的定量结果：其中，阴性测试体系中SAH生成量为A0；第一测试体系中SAH生成量为A1；第二测试体系中SAH生成量为A2；其中，△质=A1-A0；△1=A2-A1；如果△质低于预定值，则认为测试失败；如果△1△质＞0，则认为待检测的2'-O-甲基转移酶有酶活性，所述的酶活性为△1t；如果△1△质=0，则认为待检测的2'-O-甲基转移酶无活性。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 苏州近岸蛋白质科技股份有限公司 一种检测mRNA 2′-O-甲基转移酶活性的方法
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