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【发明公布】一种PVX病毒快速鉴定方法及其应用_中国烟草总公司广东省公司_201611262745.0 

申请/专利权人:中国烟草总公司广东省公司

申请日:2016-12-30

公开(公告)日:2017-05-24

公开(公告)号:CN106702023A

主分类号:C12Q1/70(2006.01)I

分类号:C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/18(2006.01)I;C12R1/94(2006.01)N

优先权:

专利状态码:失效-发明专利申请公布后的撤回

法律状态:2020.09.11#发明专利申请公布后的撤回;2017.06.16#实质审查的生效;2017.05.24#公开

摘要:本发明提出了一种PVX病毒快速鉴定方法,将PVX病毒在鉴别寄主系统中进行传播,并根据鉴别寄主系统中不同寄主的表征进行判断;其中,所述鉴别寄主系统中的鉴别寄主包括普通烟、心叶烟、黄瓜或西葫芦、千日红、苋色藜、曼陀罗,所述鉴别寄主在接受PVX传播后的表征分别为:普通烟为斑驳、花叶、半环斑或坏死环斑;心叶烟为花叶或接种叶斑驳;黄瓜或西葫芦为不侵染;千日红为接种叶红色边缘、枯斑或黄斑;苋色藜为坏死或枯斑;曼陀罗为花叶、坏死斑。方法简单,成本低廉,且结果可靠。可进行推广使用。本发明还涉及一种PVX病毒快速鉴定方法在农业种植中的应用。

主权项:一种PVX病毒快速鉴定方法,其特征在于,通过将PVX病毒在鉴别寄主系统中进行传播,并根据鉴别寄主系统中不同寄主的表征进行判断;其中,所述鉴别寄主系统中的鉴别寄主包括普通烟、心叶烟、黄瓜或西葫芦、千日红、苋色藜、曼陀罗,所述鉴别寄主在接受PVX传播后的表征分别为:

全文数据:一种PVX病毒快速鉴定方法及其应用技术领域[0001]本发明涉及农业检测领域,特别是指一种PVX病毒快速鉴定方法及其应用。背景技术[0002]农业种植中,虫害病害等,一直是种植业的危害,关系到农产品的质量、产量等,有时甚至会造成农产品颗粒无收,因此,在虫害病害的防治上,一直是农业种植中极为重要的环节,而农药即是解决这个一问题的有效方法,但随着环保理念的加深,以及健康食品的普及,人们对于无公害、无农药农产品的需求不断提升,而且,市场上也屡有农产品农药残留超标的报道,农药残留对于人体健康的损害是非常严重的,因此,需要严格控制农药的喷洒;此外,对于有些农产品,如烟叶,由于吸食的即为烟株的烟叶器官,如果喷洒过多农药,将直接影响到产品的质量以及危及吸食者的身体健康,从而对烟叶种植中虫害病害的去除提出了更为苛刻的要求。并且,病害的感染相对虫害更加难以处理,表现为病害原因难以判断,许多病害的表征特征相似,从而,在病害的防治中,常常由于无法判断病害,而采用大量的广谱的灭害措施,导致过多甚至不必要的农药使用,病害的判断时间过长,也会造成对于病害的去除带来影响,进而影响到产品的产量和质量。[0003]马铃薯X病毒potatovirusX,PVX是马铃薯上重要的病毒之一,主要症状是轻型花叶,病叶稍有波纹,小叶片上有大小不等、形状不规则的黄绿色斑驳,其自然传播主要依靠种薯和介体。[0004]鉴定马铃薯病毒有先进电镜技术、酶联免疫吸附技术、单克隆抗体技术等,以及采用指示植物,指示植物有千日红(GomphrenaglobosaL、白花刺果蔓陀萝Daturastramonium、光蔓陀萝(Daturametel、指尖椒(Capsicumannum、普通烟NicotianatabacumL、黄苗输(Nicotianasamsun、心叶烟(Nicotianaglutinosa、灰条藜enopodiumalbum,苋色藜(Chenopodiumamaranticolor等,但指示植物的采用,是基于已经可以区分后进行的核实,并且,上述简单的罗列,很难将不同的病毒感染相互区分,从而会造成误判。[0005]目前,对于PVX病毒的防治虽然较为成熟,但如何及时发现和鉴别出PVX病毒,成为PVX病毒去除的一个关键,常规的PVX病毒的鉴定包括血清学鉴定方法,双抗体夹心酶联免疫吸附检测法DAS—ELISA和抗原直接包被法,电子显微镜法等,上述鉴定方式,技术要求与设备要求较高,或者成本大等,并不便于种植人员使用,而一般的经验判断又相对较为粗糙,常常出现错误的判断。因此,需要针对种植人员提出一种更加便捷,成本低,鉴定速度快,且结果相对可靠的鉴定方法。发明内容[0006]本发明提出一种PVX病毒快速鉴定方法,鉴定更加便捷,成本低,且结果相对可靠。[0007]本发明的技术方案是这样实现的:一种PVX病毒快速鉴定方法,通过将PVX病毒在鉴别寄主系统中进行传播,并根据鉴别寄主系统中不同寄主的表征进行判断;其中,所述鉴别寄主系统中的鉴别寄主包括普通烟、心叶烟、黄瓜或西萌芦、千日红、苋色藜、曼陀罗;所述鉴别寄主在接受PVX传播后的表征分别为:[0008]普通烟斑驳、花叶、半环斑或坏死环斑;[0009]心叶烟花叶或接种叶斑驳;[0010]黄瓜或西萌芦不侵染;[0011]千日红接种叶红色边缘、枯斑或黄斑;[0012]苋色藜坏死或枯斑;[0013]曼陀罗花叶、坏死斑。[0014]进一步,针对PVX病毒的传播特征,采用的传播方式为种薯传播或汁液摩擦传播。[0015]当待测病毒与所述鉴别寄主进行蚜虫传播或汁液摩擦传播,所述鉴别寄主的表征为上述所列的症状时,即可判断待测病毒为PVX病毒。方法简单,成本低廉,且结果相对可与巨O[0016]所述PVX病毒快速鉴定方法在农业种植中的应用。将鉴别寄主系统与目标农作物间种,并根据鉴别寄主的表征判断是否有PVX病毒感染,如有则采取相应的杀毒措施。[0017]本发明的所述PVX病毒快速鉴定方法,结合了PVX病毒感染的特性,研究了不同寄主对于PVX病毒感染后的表征,进行了有机的组合判断,形成对PVX病毒鉴定的系统与方法,此外,本发明的鉴别寄主系统还结合了其他病毒的感染表征,并进行了区分,防止不同的病毒主要的农业种植中出现的病毒种类在浸染了所述鉴别寄主系统后,出现相同即重复表征的情况,而导致鉴别错误。具体实施方式[0018]下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。[0019]实施例1[0020]烟草种植中使用本发明的PVX病毒快速鉴定方法[0021]在烟田中种植烟草,并在烟垄中间隔种植若干排鉴别寄主,包括普通烟、心叶烟、黄瓜或西萌芦、千日红、苋色藜、曼陀罗。[0022]种植期间,如发现烟叶出现花叶,则将病变较为严重的烟叶采摘,然后将其磨碎,把磨碎的汁液与鉴别寄主的叶片进行摩擦传播。[0023]摩擦后,各出现如下情形:[0024]普通烟花叶;[0025]心叶烟花叶;[0026]黄瓜或西萌芦花叶;[0027]千日红花叶或枯斑;[0028]苋色藜枯斑;[0029]曼陀罗花叶或接种叶枯斑。[0030]则可判断为感染病毒为PVX病毒。[0031]在电镜下观察核实,实属PVX病毒。[0032]实施例2[0033]前处理同实施例1,如摩擦后,出现如下情形:[0034]普通烟花叶;[0035]心叶烟花叶;[0036]黄瓜或西萌芦花叶;[0037]千日红花叶或枯斑;[0038]苋色藜枯斑;[0039]曼陀罗花叶或接种叶枯斑。[0040]则可判断为感染病毒并非为PVX病毒,经电镜核实为PVY病毒。[0041]本发明从传统的植株病变指示出发,创造性的表现并非仅是在选取多种寄主的对不同的病害的不同指示作用,形成科学合理的组合,同时表现在将不同的病害相互区分,即同样的鉴别寄主系统,针对不同的病害具有不同的指示效果,防止重复,既达到了病害的鉴定,同时也对不同病害进行了区分。[0042]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

权利要求:1.一种PVX病毒快速鉴定方法,其特征在于,通过将PVX病毒在鉴别寄主系统中进行传播,并根据鉴别寄主系统中不同寄主的表征进行判断;其中,所述鉴别寄主系统中的鉴别寄主包括普通烟、心叶烟、黄瓜或西萌芦、千日红、苋色藜、曼陀罗,所述鉴别寄主在接受PVX传播后的表征分别为:普通烟斑驳、花叶、半环斑或坏死环斑;心叶烟花叶或接种叶斑驳;黄瓜或西葫芦不侵染;TH红接种叶红色边缘、枯斑或黄斑;苋色藜坏死或枯斑;曼陀罗花叶、坏死斑。2.如权利要求1中所述PVX病毒快速鉴定方法,其特征在于:传播的方式为种薯传播或汁液摩擦传播。3.如权利要求1或2中所述PVX病毒快速鉴定方法在农业种植中的应用。4.如权利要求3中所述PVX病毒快速鉴定方法在农业种植中的应用,其特征在于:将鉴别寄主系统与目标农作物间种,并根据鉴别寄主的表征判断是否有PVX病毒感染,如有则采取相应的杀毒措施。

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