申请/专利权人：新疆农业科学院园艺作物研究所

申请日：2019-12-09

公开（公告）日：2021-04-09

公开（公告）号：CN110923231B

主分类号：C12N15/113(20100101)

分类号：C12N15/113(20100101);C12N15/84(20060101);A01H4/00(20060101);A01H5/00(20180101);A01H6/82(20180101)

优先权：

专利状态码：失效-未缴年费专利权终止

法律状态：2022.11.18#未缴年费专利权终止;2020.04.21#实质审查的生效;2020.03.27#公开

摘要：本发明属于植物基因工程领域，具体公开了一种运用CRISPRCas9基因编辑系统创制果实高固形物含量的番茄材料的方法。包括步骤：（1）对控制番茄固形物的基因SIVPE5进行序列分析，确定特异的sgRNA序列；（2）构建含有sgRNA和Cas9蛋白的表达载体；（3）利用农杆菌侵染法将重组载体转化到果实低固形物含量的番茄中，获得T0代转基因番茄植株；（4）将SIVPE5基因序列发生突变的T0代植株种植于温室，自交获得T1代植株，从T1代中筛选不含有外源转基因成份但SIVPE5基因发生纯合突变且果实固形物含量高的植株，即为果实高固形物含量的番茄材料。本方法成本低，缩短创制周期，一年之内即可获得果实高固形物含量的番茄材料，且该番茄材料不含有外源基因，安全无风险。

主权项：1.一种运用CRISPRCas9基因编辑系统创制果实高固形物含量的番茄材料的方法，其特征在于：在SIVPE5基因如SEQIDNO.1所示的第一个外显子和第二个外显子上设计两个gRNA靶位点，第一个gRNA靶位点的序列为：5’-TCGGAAGCTTCCAGATTCTT-3’如SEQIDNO.2所示；第二个gRNA靶位点的序列为：5’-TGCGTATCAGCTATTGAGAA-3’，如SEQIDNO.3所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 新疆农业科学院园艺作物研究所 一种果实高固形物含量的番茄材料的创制方法

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