申请/专利权人：石河子大学

申请日：2020-12-25

公开（公告）日：2021-04-13

公开（公告）号：CN112646840A

主分类号：C12N15/866(20060101)

分类号：C12N15/866(20060101);C07K14/18(20060101);G01N33/569(20060101);G01N33/68(20060101);A61K39/12(20060101);A61P31/14(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.11.18#授权;2021.04.30#实质审查的生效;2021.04.13#公开

摘要：本发明属于兽用生物制品技术领域，尤其涉及一种杆状病毒表达系统制备牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的方法及应用。将BVDV‑LC株E2基因连接至pFastBac1重组杆状病毒转移载体，在大肠杆菌中通过同源重组获得重组杆状病毒载体rBacmid‑E2，转染Sf9昆虫细胞后获得第一代重组杆状病毒P1，将P1代病毒继续感染Sf9昆虫细胞获得感染能力高的第二代重组杆状病毒P2，再将P2代病毒扩大培养后纯化得到E2蛋白。将本发明制备的E2蛋白作为诊断抗原和亚单位疫苗，能够表现出更好的优势，可以作为候选抗原进行疫苗和ELISA试剂盒的开发。

主权项：1.一种杆状病毒表达系统制备牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：将BVDV-LCE2基因序列前端添加His标签后，连接至pFastBac1质粒，得到重组转移载体；将重组转移载体转化至E.coliDH10BacTM中，得到重组杆粒；用重组杆粒转染Sf9昆虫细胞收获P1代重组杆状病毒；将P1代病毒继续感染Sf9昆虫细胞获得感染能力高的第二代重组杆状病毒P2；再将P2代病毒扩大培养后纯化得到E2蛋白。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 石河子大学 一种杆状病毒表达系统制备牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的方法及应用

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