申请/专利权人：辽宁省农业科学院

申请日：2017-12-06

公开（公告）日：2021-06-18

公开（公告）号：CN108048346B

主分类号：C12N1/20(20060101)

分类号：C12N1/20(20060101);C12N1/14(20060101);C05G1/00(20060101);A01G18/20(20180101);C12R1/01(20060101);C12R1/72(20060101);C12R1/645(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2021.06.18#授权;2018.06.12#实质审查的生效;2018.05.18#公开

摘要：本发明公开了一种用于羊肚菌栽培外援营养的复合菌剂及其应用，属于食用菌栽培领域。本发明营养料使用的复合菌剂包括产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉。按照稻壳30‑35份，秸秆30‑35份，菌糠30‑35份，石膏1‑2份，葡萄糖2‑3份，食盐1‑2份和磷酸二氢钾0.1‑0.3份的配方加入复合菌剂发酵，装入塑料菌袋，料袋同一侧扎眼，孔径1‑2cm，在羊肚菌菌床两侧摆放2行，开孔处贴紧覆土。本发明的复合菌剂共生协调，互不拮抗，与基质发酵后能够提供充足的外援营养。本发明利用复合菌剂和富含促生长物质的菌糠作为外援营养，能够显著提高产量和加速羊肚菌萌发速度。

主权项：1.一种羊肚菌栽培外援营养料，其特征在于，由基质、复合菌剂和水制成；所述的基质，按重量份计，稻壳30-35份、秸秆30-35份、菌糠30-35份、石膏1-2份、葡萄糖2-3份、食盐1-2份、磷酸二氢钾0.1-0.3份；所述的复合菌剂，按重量份计，由产黄纤维单胞菌3-5份，产朊假丝酵母2-4份和白地霉2-4份组成；所述的复合菌剂的加入量为基质重量的4-6%；所述的水的加入量为调节营养料的水含量至60-65%。

全文数据：一种用于羊肚菌栽培外援营养的复合菌剂及其应用技术领域[0001]本发明属于食用菌栽培及微生物利用领域，特别涉及一种羊肚菌栽培外援营养的复合菌剂及利用其制作的营养料。背景技术[0002]羊肚菌[MorehellaesculentaL.Pers]是一种珍稀的食用菌和药用菌，于1818年被发现，因其状如羊肚而得名。羊肚菌的营养成份，可与牛乳、肉和鱼粉相当。因此，国际上常称它为“健康食品”之一。羊肚菌还具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、壮阳、补脑、提神之功能，对脾胃虚弱、消化不良、痰多气短、头晕失眠有良好的治疗作用。民间有“年年吃羊肚、八十照样满山走”的说法。[0003]关于羊肚菌最早栽培的记载为1883年，之后的100多年有了许多羊肚菌栽培出菇的报道，其中标志性的突破是1982年Ower人工控制栽培的成功，之后羊肚菌栽培研究进入快速发展期。1994年8月24日，TerryFarmsInc.宣布建成世界上第一个羊肚菌栽培工厂，2002年，云南玉龙县鲁甸乡李红斌等采用新鲜及干燥子实体作菌种，再以圆叶杨作辅料栽培羊肚菌获得成功;2003年，赵琪等采用纯培养的尖顶羊肚菌菌丝体播种在农田和退耕还林地，另加少量圆叶杨作辅料，于2004年获得成功。朱斗锡等经过27年研究，2012年实现羊肚菌商业化栽培。[0004]羊肚菌栽培虽然已取得重大的进展，但还有许多科学技术问题尚未得到解决，严重制约羊肚菌产业化发展，也是种植的风险所在，羊肚菌栽培的营养袋制作就是其中一个关键问题。目前营养袋在羊肚菌大田栽培发展中起到了关键性的作用，在此之前，羊肚菌的栽培多年未有突破，2003年四川林科院谭方和老师借助美国80年代几个专利的思路，差别化的实现了国内的大田栽培技术，起初这样的技术处理被称作“菌丝触合技术”，后来，当时的四川省农科院的郭勇老师将立袋改为横摆袋更名为“外援营养袋”。在羊肚菌商业化栽培阶段，未用到外援营养的栽培基本以失败告终，目前技术体系下外援营养袋的缺失对产量有很大的影响。科学试验也表明，营养袋的制作工艺也对产量有至关重要的影响。发明内容[0005]本发明的目的之一是针对现有羊肚菌栽培外援营养存在的问题，提供一种用于羊肚菌栽培外援营养的复合菌剂。[0006]本发明的目的之二是提供一种用于羊肚菌栽培外援营养的营养料。[0007]本发明的目的之三是提供一种用于羊肚菌栽培外援营养的营养料的使用方法。[0008]为实现上述目的，本发明采用的技术方案为:一种用于羊肚菌栽培外援营养的复合菌剂，由产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉组成。优选的，按重量份计，产黄纤维单胞菌3-5份，产朊假丝酵母2-4份、白地霉2-4份。[0009]—种羊肚菌栽培外援营养料，由基质、上述的复合菌剂和水制成;所述的基质由稻壳、秸杆、菌糠、石膏、葡萄糖、食盐和磷酸二氢钾组成;所述的复合菌剂的加入量为基质重量的4-6%;所述的水的加入量为调节营养料的水含量至60-65%。[0010]所述的基质，按重量份计，稻壳30-35份、秸杆30-35份;菌糠30-35份、石膏1-2份、葡萄糖2-3份、食盐1-2份、磷酸二氢钾0.1-0.3份。[0011]—种羊肚菌栽培外援营养料，制备方法包括如下步骤：[0012]1分别将产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉在液体培养基中扩大培养;优选的，所述的液体培养基是:可溶性淀粉l_20g，酵母浸膏l-10g，蛋白胨l_5g，硝酸钾0.1-3g，硫酸猛0·lmgL〜10mgL，钼酸钠0·lmgL〜10mgL，磷酸氢二钾l_6g，氯化钠0·8-5克，硫酸镁0.5-4克，水1000毫升，调整pH值到7.2〜7.4。[0013]2秸杆预处理:将秸杆粉碎至0.5-1cm;[0014]3菌糠预处理:将菌糠烘干至含水量低于10%;[0015]4按上述的重量份，取稻壳、预处理的秸杆、预处理的菌糠、石膏、葡萄糖、食盐和磷酸二氢钾，混合均匀后，加水调节含水量为60-65%，加入基质重量4-6%的复合菌剂，混合均匀，堆成圆堆状后覆膜发酵，当料温达到55-58Γ时，翻料一次，继续发酵，料温再次达至Ij55-58°C时，摊开冷却。[0016]羊肚菌栽培外援营养料在栽培羊肚菌中的使用方法。方法如下：将羊肚菌栽培外援营养料装入塑料菌袋，在料袋同一侧扎若干孔，孔径l_2cm，两端扎紧;在羊肚菌菌床两侧按顺序摆放2行，开孔处贴紧覆土。[0017]本发明的有益效果是:本发明的复合菌剂共生协调，互不拮抗，与基质发酵后能够提供充足的外援营养。本发明利用复合菌剂和富含促生长物质的菌糠作为外援营养，能够显著提高产量和加速羊肚菌萌发速度。本发明制作工艺和使用方法具有简单、方便、实用、效果好和成本低的优势。具体实施方式[0018]复合菌剂活性成分包括以下菌株:Cellulomonas产黄纤维单胞菌保藏编号ACCC04313Xandida产朊假丝酵母保藏编号ACCC20059、Geotrichum白地霉（保藏编号ACCC21170，均购于中国农业微生物菌种保藏管理中心。[0019]斜面培养基制备。具体配方为:可溶性淀粉l-20g，酵母浸膏l-10g，蛋白胨l-5g，硝酸钾0·l_3g，硫酸猛0·lmgL〜10mgL，钼酸钠0·lmgL〜10mgL，磷酸氢二钾l_6g，氯化钠0.8-5克，硫酸镁0.5-4克，琼脂20g，水1000毫升，调整pH值至1」7.2〜7.4。培养基加热溶于水后在121°C条件下灭菌备用，灭菌30min，然后分装入培养皿。[0020]将上述产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉菌种分别接种于斜面培养基，在38°C条件下恒温静置培养24h，显微镜检测无杂菌感染，并且芽孢率大于90%。将培养好的菌种在3°C条件以下保存。[0021]液体培养基制备。具体配方为:可溶性淀粉l-20g，酵母浸膏l-10g，蛋白胨l-5g，硝酸钾0·l_3g，硫酸猛0·lmgL〜10mgL，钼酸钠0·lmgL〜10mgL，磷酸氢二钾l_6g，氯化钠0.8-5克，硫酸镁0.5-4克，水1000毫升，调整pH值到7.2〜7.4。培养基加热溶于水后分装入菌种瓶内，在121°C条件下灭菌备用，灭菌30min。[0022]将在斜面培养基中培养好的菌种接种于液体培养基中，在160-200rpm，33°C〜35°C条件下恒温振荡培养22h〜24h，分别得到产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉液体菌种。[0023]实施例1一种羊肚菌栽培外援营养料[0024]一复合菌剂[0025]PDA斜面培养基：培养基配方为：可溶性淀粉15g，酵母浸膏5g，蛋白胨3g，硝酸钾Ig，硫酸锰5mgL，钼酸钠6mgL，磷酸氢二钾6g，氯化钠3克，硫酸镁4克，琼脂20g，水1000毫升，调整pH值到7.2。121°C灭菌30min，然后分装到培养皿内。[0026]将产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉菌种接种于斜面培养基，在38°C条件下恒温静置培养24h，显微镜检测无杂菌感染，并且芽孢率大于90%。将培养好的菌种在3°C条件以下保存。[0027]液体培养基:培养基配方为:可溶性淀粉15g，酵母浸膏5g，蛋白胨3g，硝酸钾lg，硫酸锰lmgL，钼酸钠3mgL，磷酸氢二钾3g，氯化钠5克，硫酸镁1.5克，水1000毫升，调整pH值到7.4。分装入菌种瓶内，培养基在121°：灭菌备用，灭菌3〇1^11。[0028]将在PDA斜面培养基中培养好的菌种，接种于液体培养基中，在180rpm，33°C条件下恒温振荡培养24h，分别得到产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉液体菌种。[0029]将产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉液体菌种，按重量比5:3:3的比例进行混合，获得复合菌剂。[0030]二羊肚菌栽培外援营养料制备及使用[0031]1秸杆预处理:将秸杆粉碎至0.5-1cm;[0032]2菌糠预处理:将菌糠烘干至含水量低于10%;[0033]3基质配方:稻壳35份;秸杆30份;菌糠30份;食用葡萄糖3份;石膏2份;食盐1份；磷酸二氢钾0.1份。[0034]4将稻壳、秸杆、菌糠、食用葡萄糖、石膏、食盐和磷酸二氢钾，混合拌匀后加水，含水量调节至65%，加入复合菌剂，复合菌剂加入量为基质重量的5%。[0035]5混合均匀后，堆成圆堆状，覆盖一层塑料薄膜，当料温达到56°C后翻料一次，然后继续发酵，当料温再次达到56°C时，将料摊开降温，得羊肚菌栽培外援营养料。[0036]6将羊肚菌栽培外援营养料装入15cmX55cmX0.04cm的塑料菌袋，两端扎紧。在料袋的同一侧扎直径Icm的圆孔4个，在羊肚菌菌床两侧按顺序摆放2行，开孔处朝下，贴紧床面覆土。[0037]实施例2—种羊肚菌栽培外援营养料[0038]一复合菌剂[0039]PDA斜面培养基:培养基配方为:可溶性淀粉Sg，酵母浸膏3g，蛋白胨2g，硝酸钾2g，硫酸锰lmgL，钼酸钠3mgL，磷酸氢二钾3g，氯化钠5克，硫酸镁1.5克，琼脂20g，水1000毫升，调整pH值到7.3。培养基在121°：灭菌3〇1^11，然后分装到培养皿内。[0040]将产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉菌种接种于斜面培养基，在38°C条件下恒温静置培养24h，显微镜检测无杂菌感染，并且芽孢率大于90%。将培养好的菌种在3°C条件以下保存。[0041]液体培养基:培养基配方为:可溶性淀粉15g，酵母浸膏5g，蛋白胨3g，硝酸钾lg，硫酸锰lmgL，钼酸钠3mgL，磷酸氢二钾3g，氯化钠5克，硫酸镁1.5克，水1000毫升，调整pH值到7.4。分装入菌种瓶内，培养基在121°：灭菌备用，灭菌3〇1^11。[0042]将在PDA斜面培养基中培养好的菌种，接种于液体培养基中，在200rpm，35°C条件下恒温振荡培养22h，分别得到产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉液体菌种。[0043]将产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉液体菌种，按重量比4:4:3的比例进行混合，获得复合菌剂。[0044]二羊肚菌栽培外援营养料制备及使用[0045]1秸杆预处理:将秸杆粉碎至0.5-1cm;[0046]2菌糠预处理:将菌糠烘干至含水量低于10%;[0047]3基质配方:稻壳32份，秸杆30份，菌糠30份，食用葡萄糖2份，石膏1份，食盐1份，磷酸二氢钾0.1份。[0048]4将稻壳、秸杆、菌糠、食用葡萄糖、石膏、食盐和磷酸二氢钾，混合拌匀后加水，含水量调节至65%，加入复合菌剂，复合菌剂加入量为基质重量的5%。[0049]5混合均匀后，堆成圆堆状，覆盖一层塑料薄膜，当料温达到56°C后翻料一次，然后继续发酵，当料温再次达到56°C时，将料摊开降温，得羊肚菌栽培外援营养料。[0050]6将羊肚菌栽培外援营养料装入75cmX50cmX0.02cm的塑料菌袋，两端扎紧。在料袋的同一侧扎直径1.5cm的圆孔4个，菌床两侧按顺序摆放2行，开孔处朝下贴紧床面。[0051]将不同的外援营养进行羊肚菌栽培试验，生产方式、培养条件等其他条件均一致，其中常规营养袋配方如下:麦粒33%，稻秸杆33%，木肩33%，石膏1%，试验结果见表1。[0052]表1[0053][0054]“+，++，+++”表示羊肚菌菌丝长势[0055]由表1可以明显看出，本发明的外援营养料较常规方法效果突出，初始萌发平均时间缩短2-2.5天，污染率降低了4-4.1%，出菇时间缩短了12-14天，产量提高了2.l-2.4kgm2〇

权利要求：1.一种用于羊肚菌栽培外援营养的复合菌剂，其特征在于，由产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉组成。2.按照权利要求1所述的一种用于羊肚菌栽培外援营养的复合菌剂，其特征在于，所述的复合菌剂，按重量份计，产黄纤维单胞菌3-5份，产朊假丝酵母2-4份、白地霉2-4份。3.—种羊肚菌栽培外援营养料，其特征在于，由基质、权利要求1或2所述的复合菌剂和水制成;所述的基质由稻壳、秸杆、菌糠、石膏、葡萄糖、食盐和磷酸二氢钾组成;所述的复合菌剂的加入量为基质重量的4-6%;所述的水的加入量为调节营养料的水含量至60-65%。4.按照权利要求3所述的一种羊肚菌栽培外援营养料，其特征在于，所述的基质，按重量份计，稻壳30-35份、猜杆30-35份、菌糠30-35份、石霄1-2份、葡萄糖2-3份、食盐1-2份、磷酸二氢钾0.1-0.3份。5.按照权利要求4所述的一种羊肚菌栽培外援营养料，其特征在于，制备方法包括如下步骤：1分别将产黄纤维单胞菌、产朊假丝酵母和白地霉在液体培养基中扩大培养；2秸杆预处理:将秸杆粉碎至0.5-lcm;3菌糠预处理:将菌糠烘干至含水量低于10%;4按权利要求4所述的重量份，取稻壳、预处理的秸杆、预处理的菌糠、石膏、葡萄糖、食盐和磷酸二氢钾，混合均匀后，加水调节含水量为60-65%，加入基质重量4-6%的复合菌剂，混合均匀，堆成圆堆状后覆膜发酵，当料温达到55-58Γ时，翻料一次，继续发酵，料温再次达到55-58°C时，摊开冷却。6.按照权利要求5所述的一种羊肚菌栽培外援营养料，其特征在于，所述的液体培养基是:可溶性淀粉l-20g，酵母浸膏l-10g，蛋白胨l-5g，硝酸钾0·l-3g，硫酸猛0·lmgL〜IOmgL，钼酸钠0·lmg1〜10mgL，磷酸氢二钾l-6g，氯化钠0·8-5克，硫酸镁0·5-4克，水1000毫升，调整pH值到7.2〜7.4。7.权利要求3、4、5或6任一项所述的羊肚菌栽培外援营养料在栽培羊肚菌中的应用。8.按照权利要求7所述的应用，其特征在于，方法如下：将羊肚菌栽培外援营养料装入塑料菌袋，在菌袋同一侧扎若干孔，孔径l_2cm，两端扎紧;在羊肚菌菌床两侧按顺序摆放2行，开孔处贴紧覆土。

百度查询： 辽宁省农业科学院 一种用于羊肚菌栽培外援营养的复合菌剂及其应用

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