申请/专利权人：中南大学湘雅二医院

申请日：2023-03-07

公开（公告）日：2023-05-12

公开（公告）号：CN116098126A

主分类号：A01K67/027

分类号：A01K67/027;C12N15/12;C12N5/077;A61K49/00

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.05.30#实质审查的生效;2023.05.12#公开

摘要：本发明公开一种可特异性清除MHCII+脂肪细胞的基因工程小鼠及MHCII+脂肪细胞的制备方法及应用。基因工程小鼠的制备方法：1在H2‑Aa基因最后一个外显子后插入一个‑loxp‑STOP‑loxp‑DTR‑片段，由于STOP片段阻断基因转录，该小鼠所有细胞都不能表达DTR；2将该小鼠与Adipoq‑cre小鼠杂交后，只有脂肪细胞中的STOP片段将被切除，这样同时表达H2‑Aa基因和cre基因的MHCII+脂肪细胞就能够表达DTR，得到aH2‑AaDTR小鼠；3aH2‑AaDTR小鼠通过与纯种C57BL6J小鼠杂交5代纯化遗传背景后用于后续实验研究。本发明还提供MHCII+脂肪细胞在制备改善肥胖诱导的胰岛素抵抗的产品中的应用、在制备改善肥胖诱导的脂肪组织Th1细胞浸润的产品中的应用、在制备改善肥胖诱导的脂肪组织M1巨噬细胞浸润的产品中的应用。

主权项：1.一种可特异性清除MHCII+脂肪细胞的基因工程小鼠的制备方法：1构建H2-AaDTR小鼠：在C57BL6J小鼠的H2-Aa基因上进行基因编辑，在H2-Aa基因最后一个外显子第4外显子后插入一个-loxP-eGFP-STOP-loxP-DTR-mCherry-片段，其中loxP位点是Cre重组酶识别并结合的序列，eGFP是加强型绿色荧光蛋白，STOP是转录终止序列，能够阻断后面基因的转录，DTR是白喉毒素受体，mCherry是一种红色荧光蛋白，该小鼠中表达H2-Aa基因即表达MHCII的细胞将表达eGFP荧光蛋白，而不表达DTR和mCherry，得到H2-AaDTR小鼠；2将H2-AaDTR小鼠与Adipoq-cre小鼠杂交后得到aH2-AaDTR小鼠：该小鼠的脂肪细胞能够表达Cre重组酶，Cre重组酶识别loxP位点并将两个loxP位点间的DNA序列切断，可以同时表达H2-Aa基因和Cre基因的细胞，即能够表达DTR和mCherry荧光蛋白的所述可特异性清除MHCII+脂肪细胞的基因工程小鼠，即aH2-AaDTR小鼠。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中南大学湘雅二医院 一种可特异性清除MHCII⁺脂肪细胞的基因工程小鼠及MHCII⁺脂肪细胞的制备方法及应用

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