申请/专利权人:上海市生物医药技术研究院
申请日:2016-08-30
公开(公告)日:2023-06-02
公开(公告)号:CN111004854B
主分类号:C12Q1/689
分类号:C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2023.06.02#授权;2020.05.08#实质审查的生效;2020.04.14#公开
摘要:本发明公开了一种同时针对创伤弧菌和霍乱弧菌的快速恒温检测方法、引物组及试剂盒。所述方法为:从待测样品中提取基因组DNA;以所述基因组DNA为模板,以能扩增创伤弧菌和霍乱弧菌共有特异性序列的引物组为引物,在酶反应体系下进行恒温扩增反应;通过判断反应结果是否为阳性,确定待测样品中是否存在创伤弧菌和或霍乱弧菌。本发明检测方法具有高灵敏度和高特异性,检测时间短,结果判定简单,操作便捷,成本低,具广泛应用前景。
主权项:1.一种非诊断目的的同时针对创伤弧菌和霍乱弧菌的快速恒温检测方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)从待测样品中提取基因组DNA;(2)以所述基因组DNA为模板,以能扩增创伤弧菌和霍乱弧菌基因组共有特异性碱基序列的引物组作为引物,在酶反应体系下进行恒温扩增反应;(3)通过判断反应结果是否为阳性,确定待测样品中是否存在创伤弧菌和或霍乱弧菌;其中,所述创伤弧菌和霍乱弧菌基因组共有特异性碱基序列为GI号为320154846的创伤弧菌基因组的2698869~2699116bp位和GI号为147673035的霍乱弧菌基因组的216343~216590bp位序列;其中,所述能扩增创伤弧菌和霍乱弧菌基因组共有特异性碱基序列的引物组为引物组B;引物组B:上游外引物F3_B:5’-CGAGACTTGTGACGAGCTG-3’(SEQIDNO:5);下游外引物B3_B:5’-GCGCTATCCAAGCTGAGAA-3’(SEQIDNO:6);上游内引物FIP_B:5’-TGCAACTGCTGCATTCGCTGTATAAGGCCTTTAGTCGCCATG-3’(SEQIDNO:7);下游内引物BIP_B:5’-CCAGCAGCGATTGCAGCAACACAATGCTAGCCGTCGTTC-3’(SEQIDNO:8)。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 上海市生物医药技术研究院 同时针对创伤弧菌和霍乱弧菌的快速恒温检测方法、引物组及试剂盒
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