申请/专利权人：南京启真基因工程有限公司

申请日：2020-10-28

公开（公告）日：2023-07-25

公开（公告）号：CN112522261B

主分类号：C12N15/113

分类号：C12N15/113;C12N9/22;C12N15/87;C12N5/10;A01K67/027

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.07.25#授权;2021.04.06#实质审查的生效;2021.03.19#公开

摘要：本发明公开了一种用于制备LMNA基因突变的扩张型心肌病克隆猪核供体细胞的CRISPRCas9系统及其应用。本发明提供了一种试剂盒，包括sgRNALMNA‑E7‑g1或质粒pKG‑U6gRNALMNA‑E7‑g1。sgRNALMNA‑E7‑g1，的靶序列结合区如SEQIDNO：6中第1‑20位核苷酸所示。质粒pKG‑U6gRNALMNA‑E7‑g1，其转录得到sgRNALMNA‑E7‑g1。本发明还保护一种制备重组细胞的方法，包括如下步骤：将质粒pKG‑U6gRNALMNA‑E7‑g1和质粒pKG‑GE3共转染猪细胞，得到重组细胞。本发明为通过基因编辑手段获得扩张型心肌病猪模型奠定了坚实的基础，本发明对于扩张型心肌病药物的研发及揭示该病的发病机制具有重大应用价值。

主权项：1.一种试剂盒，包括sgRNALMNA-E7-g1或质粒pKG-U6gRNALMNA-E7-g1；所述试剂盒的用途为如下a或b或c：a制备重组细胞；b制备扩张型心肌病猪模型；c制备扩张型心肌病猪细胞模型；sgRNALMNA-E7-g1，其靶序列结合区如SEQIDNO：6中第1-20位核苷酸所示；质粒pKG-U6gRNALMNA-E7-g1是借助限制性内切酶BbsI将sgRNALMNA-E7-g1的靶序列结合区的编码序列插入pKG-U6gRNA载体得到的；pKG-U6gRNA载体如SEQIDNO：3所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京启真基因工程有限公司 用于制备LMNA基因突变的扩张型心肌病克隆猪核供体细胞的CRISPR系统及其应用

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