申请/专利权人：山东省科学院生物研究所

申请日：2022-02-14

公开（公告）日：2023-08-15

公开（公告）号：CN114577763B

主分类号：G01N21/64

分类号：G01N21/64;G01N21/84

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.08.15#授权;2023.07.18#实质审查的生效;2022.06.03#公开

摘要：本发明提供了一种基于生物效应的昆仙胶囊质量控制方法与应用，主要包括如下步骤：昆仙胶囊样品乙醇提取物的制备；采用斑马鱼对昆仙胶囊样品乙醇提取物进行生物效应检测，用药浓度以昆仙胶囊样品浓度为7μgml为标准；昆仙胶囊样品生物效应检测结果：统计斑马鱼节间血管总长度为1800‑2400μm的昆仙胶囊样品为合格样品；本发明首次建立了昆仙胶囊基于生物效应的质量检查方法，并且有效避免了依据生物效应检测中出现误判的情况，对昆仙胶囊以化学成分为检测指标的现行标准提供了重要补充，尤其是对昆仙胶囊缺方、减方样品的检测，提供了一种有效的生物检测方法。

主权项：1.一种基于生物效应的昆仙胶囊质量控制方法，包括如下步骤：（1）昆仙胶囊样品乙醇提取物的制备；（2）采用斑马鱼对步骤（1）中昆仙胶囊样品乙醇提取物进行生物效应检测，用药浓度以昆仙胶囊样品浓度为7μgml为标准；（3）步骤（2）中昆仙胶囊样品检测结果：统计斑马鱼节间血管总长度为2400μm以下的昆仙胶囊样品为合格样品；步骤（2）中采用斑马鱼对步骤（1）中昆仙胶囊样品乙醇提取物进行生物效应检测，包括如下步骤：①选用20hpfTg（flk1:EGFP）血管绿色荧光标记转基因斑马鱼，用1mgml链蛋白酶E脱膜，挑取脱膜后的健康胚胎随机分为空白对照组，阳性对照组，昆仙胶囊处理组，各组设置2个以上平行，每个平行10-12枚胚胎；空白对照组给予：养鱼水中含体积分数为0.1%DMSO；阳性对照组给予：养鱼水中含体积分数为0.1%DMSO+终浓度为0.175μgml的PTK787；昆仙胶囊处理组：养鱼水中含体积分数为0.1%DMSO+终浓度为0.175μgml的PTK787+终浓度为7μgml的昆仙胶囊样品；孵育温度28℃，孵育至44hpf时，在荧光显微镜下观察斑马鱼胚胎血管形态；②定量分析：使用ImageproPlus5.1测量节间血管（ISV）。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山东省科学院生物研究所 一种基于生物效应的昆仙胶囊质量控制方法与应用

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