申请/专利权人：惠州学院;泉州市洛江绿盛农业综合开发有限公司

申请日：2023-05-16

公开（公告）日：2023-09-29

公开（公告）号：CN116806697A

主分类号：A01H4/00

分类号：A01H4/00

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2023.09.29#公开

摘要：本发明提供一种改良的橙黄玉凤花种子萌发培养及小苗组培快繁方法，包括以下步骤：种子消毒处理、种子萌发培养基制备、愈伤组织增殖培养基制备、诱导茎叶分化培养基制备、叶生长培养基制备、球茎培养基制备、炼苗、移栽，本发明通过组织培养大量繁殖橙黄玉凤花，可实现满足市场需求与保护其野生资源的目的，在实验操作更加安全简便，降低了生产成本，组培苗成活率更高且更加强壮，具有极大的经济价值和社会价值。

主权项：1.一种改良的橙黄玉凤花种子萌发培养及小苗组培快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：种子消毒处理将采集的橙黄玉凤花蒴果，先用75％乙醇浸泡30s；再用10％次氯酸钠溶液分别浸泡15min、20min、25min，然后用无菌水冲洗5～6次，用无菌滤纸吸干表面水分；步骤2：种子萌发培养基制备种子萌发培养基以12MS为基本培养基，添加活性炭浓度分别为0、0.1％、0.2％，NAA浓度分别定为0、0.1、0.2uM3个处理，并添加蔗糖3％和琼脂0.8％，pH5.8～5.9。步骤3：愈伤组织增殖培养基制备愈伤组织增殖培养基以12MS为基本液体培养基，NAA浓度分别为0、0.1、0.2uM，添加活性炭浓度分别为0、0.1％、0.2％。步骤4：诱导茎叶分化培养基制备诱导茎叶分化培养基以12MS为基本培养基，6-BA和NAA一起加入培养基，6-BA浓度分别为0、0.01、0.1、0.5uM；NAA浓度分别为0、0.01、0.1、0.5uM，添加活性炭浓度分别为0、0.1％，添加蔗糖3％和琼脂0.8％，pH5.8～5.9。步骤5：叶生长培养基制备叶生长培养基以12MS为基本培养基，6-BA浓度分别为0、0.01、0.02uM；GA3浓度分别为0、0.01、0.1、1.0uM，并添加蔗糖3％和琼脂0.8％，pH5.8～5.9。步骤6：球茎培养基制备球茎培养基以12MS为基本培养基，添加不同浓度香蕉汁，每处理接种8个苗，培养基经高温高压灭菌后冷却备用，并添加蔗糖3％和琼脂0.8％，pH5.8～5.9，30天后观察根部。步骤7：炼苗、移栽炼苗与移栽将长有球茎和2片小叶的瓶苗在室温条件下炼苗7d，拧松培养瓶盖再在室温条件下炼苗7d，打开培养瓶盖在室温阴凉条件下炼苗7d。取出小苗，将根茎清洗干净后，在阴凉处晾1d，栽种至基质中。移栽苗于温室大棚培养，60d后统计移栽苗成活率。移栽苗部分用于回归野外原生境。

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