申请/专利权人：南京师范大学

申请日：2023-07-24

公开（公告）日：2023-11-24

公开（公告）号：CN117106066A

主分类号：C07K16/00

分类号：C07K16/00;C07K1/30;C07K1/34;C07K1/14

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.12.12#实质审查的生效;2023.11.24#公开

摘要：本发明公开了一种简单快速分离纯化牛初乳中SIgA的方法，包括取牛初乳在离心机离心脱脂；向初乳乳清中加入饱和硫酸铵溶液，离心保留硫酸铵沉淀物，加入磷酸盐缓冲液溶解，并加入硫酸铵溶液，并同上条件离心，得到SIgA粗品；将SIgA粗品用磷酸盐缓冲液溶解，并进行离心，将上清液用磷酸盐缓冲液溶解，用超滤膜超滤浓缩；向超滤管中加入SIgA粗品样品；进行5％‑50％线性梯度SW28超速离心，利用组分收集系统收取保存；再次向超滤管中加入合并后的纯度高的牛初乳SlgA，再次进行10％‑60％线性梯度SW41超速离心，利用组分收集鉴定系统收取保存，最终合并收集高纯度的牛初乳SlgA，本发明通过采用盐析、超滤、两次超速离心的方法直接分离和纯化SIgA，简化了工艺流程，制备方法简单快速。

主权项：1.一种简单快速分离纯化牛初乳中SIgA的方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、取牛初乳在离心机进行离心脱脂，去除底部细胞沉淀物和上部的脂肪层，收集经纱布过滤后中间的初乳乳清部分；S2、向稀释后的初乳乳清中加入饱和硫酸铵溶液，边加入、边搅拌，经过离心保留硫酸铵沉淀物，接着加入磷酸盐缓冲液溶解，再次加入饱和硫酸铵溶液，并同上条件离心后，取上层清液，调低硫酸铵饱和度进行硫酸铵盐析，再次进行离心，弃上清液，保留沉淀用，得到SIgA粗品；S3、将所得SIgA粗品用磷酸盐缓冲液充分溶解，并进行离心，保留上清液，将上清液用磷酸盐缓冲液充分溶解，用超滤膜进行超滤浓缩；S4、向超滤管中加入超滤膜浓缩的SIgA粗品样品，进行离心反复2-3次，并将浓缩液保存；S5、进行5％-50％线性梯度SW28超速离心，离心完成后，利用组分收集系统进行收取保存，通过SDS-PAGE电泳分析，合并纯度高的牛初乳SlgA；S6、再次向超滤管中加入合并后的纯度高的牛初乳SlgA，进行离心反复2-3次，并将浓缩液保存；S7、再次进行10％-60％线性梯度SW41超速离心，离心完成后，利用组分收集鉴定系统进行收取保存，通过SDS-PAGE电泳分析，最终合并收集高纯度的牛初乳SlgA。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京师范大学 一种简单快速分离纯化牛初乳中SIgA的方法

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