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【发明公布】一种蒙古鲌卵母细胞冷冻保存的方法_上海海洋大学_202311019403.6 

申请/专利权人:上海海洋大学

申请日:2023-08-14

公开(公告)日:2023-12-05

公开(公告)号:CN117158410A

主分类号:A01N1/02

分类号:A01N1/02;C12N5/075

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2023.12.22#实质审查的生效;2023.12.05#公开

摘要:本发明属于生物技术领域,公开了一种蒙古鲌卵母细胞冷冻保存的方法,步骤包括:1分散后的蒙古鲌卵母细胞先后在平衡液一和平衡液二中,分别平衡8‑12min;2转移到冷冻保护剂中,分装至冻存容器,插入液氮保存。本方法使用多种溶剂和抗氧化剂褪黑素配制冷冻保存液,将抗冻保护剂与含KCl的稀释液混合,形成用于卵母细胞冷冻保存过程中的平衡液一和平衡液二。本方法可降低细胞受到的毒性损伤、氧化损伤和机械损伤;同时采用麦管作为冷冻保存容器,降低了卵母细胞冷冻保存的成本和操作难度,提升了卵母细胞的冷冻保存效率,实现了卵母细胞的长时间保存,适用于鱼类种质保存的生产需要。

主权项:1.一种蒙古鲌卵母细胞冷冻保存的方法,其特征在于,包括如下步骤:1分散后的蒙古鲌卵母细胞先后在平衡液一和平衡液二中,分别平衡8-12min;2转移到冷冻保护剂中,分装至冻存容器,插入液氮保存;所述平衡液一含有50-60mM氯化钾、50-60mM醋酸钾、0.5-1.5mM氯化镁、5-15mM4-羟乙基哌嗪乙磺酸钾盐、0.5-1.5M二甲基亚砜、0.5-1.0M甲醇、0.5-1.0M丙二醇和0.1-0.5mM褪黑素;所述平衡液二含有50-60mM氯化钾、50-60mM醋酸钾、0.5-1.5mM氯化镁、5-15mM4-羟乙基哌嗪乙磺酸钾盐、1.5-2.5M二甲基亚砜、1.0-2.0M甲醇、1.0-2.0M丙二醇,0.5-1.0mM褪黑素;所述的冷冻保护剂含有50-60mM氯化钾、50-60mM醋酸钾、0.5-1.5mM氯化镁、5-15mM4-羟乙基哌嗪乙磺酸钾盐、2.5-3.5M二甲基亚砜、1.5-2.5M甲醇、1.5-2.5M丙二醇和0.5-1.5mM褪黑素。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 上海海洋大学 一种蒙古鲌卵母细胞冷冻保存的方法

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