申请/专利权人：中国水产科学研究院长江水产研究所

申请日：2022-01-05

公开（公告）日：2023-12-01

公开（公告）号：CN114438220B

主分类号：C12Q1/6888

分类号：C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/10;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.12.01#授权;2022.05.24#实质审查的生效;2022.05.06#公开

摘要：本发明公开了一种红鳍原鲌放流评价方法，属于动物分子遗传学领域，采集被放流红鳍原鲌亲鱼的鳍条，保存于酒精内；回捕各放流洄游点的红鳍原鲌个体，并取每个个体的鳍条；提取所有鳍条样本的DNA；利用本方法提供的5组双重PCR引物检测被捕个体和被放流红鳍原鲌亲鱼的亲子关系。本方法利用亲子鉴定技术准确鉴定被捕个体和被放流红鳍原鲌亲鱼的亲子关系，进而判断被捕红鳍原鲌个体中放流个体的数量，实现对红鳍原鲌放流效果的准确评价。

主权项：1.一种红鳍原鲌放流评价方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、采集被放流红鳍原鲌亲鱼的鳍条，保存于酒精内；S2、回捕各放流洄游点的红鳍原鲌个体，并取每个个体的鳍条；S3、提取所有鳍条样本的红鳍原鲌DNA；S4、采用5组双重PCR微卫星引物检测回捕的红鳍原鲌个体和被放流红鳍原鲌亲鱼的亲子关系；5组双重PCR微卫星引物，具体引物信息如下： 利用所述5组双重PCR微卫星引物对红鳍原鲌样品进行PCR扩增，将PCR扩增产物在10％的聚丙烯酰胺胶上进行电泳分离；根据分离结果统计PCR扩增产物的基因型；所述PCR的反应体系是25μL：10×PCRBuffer3μL，2.5mmolLdNTP2μL，MgCl23μL，上下游引物各1μL，Taq酶0.5μL，DNA模板2μL，超纯水12.5μL；所述PCR的反应程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，退火温度复性30s，72℃延伸30s，35个循环；72℃延伸10min；4℃保存；红鳍原鲌个体之间亲缘关系远近的测量方法为根据PCR产物的条带大小，使用mega5.0软件和population软件做聚类发育树，根据聚类分析图鉴定个体之间的亲缘关系。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国水产科学研究院长江水产研究所 一种红鳍原鲌放流评价方法

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