申请/专利权人：辽宁省农业科学院

申请日：2020-06-28

公开（公告）日：2023-12-08

公开（公告）号：CN111607660B

主分类号：C12Q1/6895

分类号：C12Q1/6895;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.12.08#授权;2020.09.25#实质审查的生效;2020.09.01#公开

摘要：Tan1共有4种等位基因型，即Tan1、tan1‑a、tan1‑b和tan1‑c。本发明公开了一种鉴别高粱单宁等位变异基因Tan1的方法，以引物Tan1‑BZF1和Tan1‑BZR1扩增高粱Tan1基因部分开放阅读框，PCR产物片段大小Tan1和tan1‑a为257bp，tan1‑b和tan1‑c产物大小分别为267bp和247bp；以Tan1‑BZF2和Tan1‑BZR2扩增高粱Tan1基因部分开放阅读框，tan1‑a与Tan1相比，开放阅读框580位G缺失，由于缺失产生EcoNΙ新的酶切位点，PCR片段经EcoNΙ酶切后产生344bp和454bp两条带，完成Tan1和tan1‑a的鉴别。本发明开发了高效的分子标记，为培育低单宁含量的食、饲专用型高粱材料提供更加完善、准确的检测手段。

主权项：1.一种鉴别高粱单宁Tan1等位变异基因的方法，其特征在于，Tan1-BZF1和Tan1-BZR1为分子标记的引物，以引物Tan1-BZF1和Tan1-BZR1扩增高粱Tan1基因部分开放阅读框，PCR产物片段大小Tan1和tan1-a为257bp，tan1-b和tan1-c产物大小分别为267bp和247bp；Tan1-BZF2和Tan1-BZR2为扩增多态性序列酶切法鉴定的引物，Tan1-BZF2和Tan1-BZR2扩增高粱Tan1基因部分开放阅读框，含有Tan1基因型的片段大小为799bp，tan1-a与Tan1相比，开放阅读框580位G缺失，由于该位点的缺失产生EcoNΙ新的酶切位点，PCR片段经EcoNΙ酶切后产生344bp和454bp两条带，完成Tan1和tan1-a的鉴别；所述引物Tan1-BZF1的序列为SEQ1，所述引物Tan1-BZR1的序列为SEQ2，所述引物Tan1-BZF2的序列为SEQ3，所述引物Tan1-BZR2的序列为SEQ4；其中，SEQ1：5’-CTCTGACCTCCGCTATATGG-3’，SEQ2：5’-CTGCGTCGTACACTAGCACA-3’；SEQ3：5’-TCTCCTTCGACCACCCCTA-3’，SEQ4：5’-AAGGCGATGGCCATCCAGTC-3’。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 辽宁省农业科学院 一种鉴别高粱单宁Tan1等位变异基因的分子标记的引物及鉴别方法和应用

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