申请/专利权人：重庆国际免疫创新中心有限公司

申请日：2023-08-08

公开（公告）日：2023-12-12

公开（公告）号：CN117210402A

主分类号：C12N5/078

分类号：C12N5/078

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2023.12.29#实质审查的生效;2023.12.12#公开

摘要：本发明公开了一种极微量全血中PBMC分离方法的探索，包括以下步骤：获取极微量指拇血于微量采血管中，转移全血于离心管中，并使用离心机离心；吸取离心后的血浆，将剩余全血加入PBS稀释；取离心管加入TBD淋巴细胞分离液，并加入步骤二所得的稀释后的全血；将步骤三所得的淋巴细胞分离液用离心机离心；吸取经步骤四离心后的白膜于新的离心管；洗涤；用PBS溶液混匀，计数。本发明的全血中分离PBMC的探索方法具有分离时间短、PBMC提取量多，活率更高的特点。

主权项：1.一种极微量全血中PBMC分离方法的探索，其特征是：包括以下步骤，步骤一：获取30～100ul极微量指拇血于0.5ml医用微量抗凝采血管中，混匀后，测量全血体积，转移全血于1.5mlEP管中，并使用水平离心机离心；步骤二：转移离心后的血浆至无菌EP管中，记录血浆总体积以及是否浑浊或溶血，并置于冰箱冻存，将剩余全血加入无菌PBS溶液并稀释混匀；步骤三：取上述无菌EP管加入TBD淋巴细胞分离液，并加入步骤二所得的稀释后的全血；步骤四：将步骤三所得的淋巴细胞分离液用离心机离心；步骤五：吸取经步骤四离心后的白膜100～300ul于新的离心管；步骤六：加入含BSA的DPBS溶液于步骤五所得的白膜细胞悬液中，混匀，使用离心机离心；步骤七：弃上清，加入含BSA的DPBS溶液混匀，吸取细胞悬液加入台盼蓝混匀，光镜下计数，观察是否残存少量血小板，并记录细胞活率；步骤八：若步骤七中观察到视野中残留部分血小板并对后续实验有影响的情况下，重复步骤六，再洗涤一次，重新计数并记录活率。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 重庆国际免疫创新中心有限公司 一种极微量全血中PBMC分离方法的探索

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