申请/专利权人：江西农业大学

申请日：2023-10-25

公开（公告）日：2024-01-23

公开（公告）号：CN117431222A

主分类号：C12N7/01

分类号：C12N7/01;C12N15/38;C12N15/85;C12N15/113;A61K39/245;A61P31/22;C12R1/93

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.02.09#实质审查的生效;2024.01.23#公开

摘要：本发明公开了利用腺嘌呤碱基编辑器制备gE、gI和TK三基因缺失PRV毒株的方法与应用，涉及生物技术领域，选择PRV病毒中gE、gI和TK基因的起始密码子作为靶标位点，设计七条sgRNA序列，根据sgRNA序列分别合成单链寡核苷酸，将单链寡核苷酸退火获得带粘性末端的双链DNA片段，将pU6‑sgRNA‑Puro‑2A‑EGFP载体经限制性内切酶酶切后回收片段，再与上述带粘性末端的双链DNA片段连接，获得连接产物，将连接产物转化至感受态细胞中，涂板筛选培养，挑阳性菌扩大培养，对阳性菌液抽提质粒；将质粒转染至Vero81细胞中，转染后，吸取病毒液，离心收集上清液。本发明的方法效率高，对病毒基因的改变小，不容易引起病毒的变异，成本低。

主权项：1.一种gE、gI和TK三基因缺失PRV毒株，其特征在于，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCCNO：V202325，命名为：猪伪狂犬病毒PRV-ΔTKΔgIΔgE-ABE。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江西农业大学 利用腺嘌呤碱基编辑器制备gE、gI和TK三基因缺失PRV毒株的方法与应用

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