申请/专利权人：遵义市美胜种养殖农民专业合作社

申请日：2023-11-24

公开（公告）日：2024-02-09

公开（公告）号：CN117530131A

主分类号：A01G22/30

分类号：A01G22/30;A01G7/04;A01H11/00

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.02.09#公开

摘要：本发明提供了一种可促进繁殖速度的侧枝匐灯藓培养方法，属于藓类培养技术领域。包括以下步骤：S1、培养无菌侧枝匐灯藓悬浮液；S2、制备无菌培养基；S3、接种侧枝匐灯藓悬浮液；S4、无菌配子体的大量繁殖及收集；利用本发明的培养方法对侧枝匐灯藓进行接种培养时，挑选成熟饱满的侧枝匐灯藓孢蒴进行清洗、反复浸泡并制成悬浮液，然后，利用硫酸铵、2,4‑D以及Mn制备成无菌培养基进行快速繁殖，最后，将无菌培养基均分为三份，并对侧枝匐灯藓悬浮液经过三代培养，并采用温度升高和光照强度依次增加的梯度培养方式可以促进侧枝匐灯藓的生长，使其在较短的时间内获得较好的生长状态，为后续的研究提供更好的材料。

主权项：1.一种可促进繁殖速度的侧枝匐灯藓培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、培养无菌侧枝匐灯藓悬浮液：挑选成熟饱满的侧枝匐灯藓孢蒴，并用纱布包裹，用清水清洗，直至其表面无泥沙，并用酒精浸泡并超声清洗3-5次，而后用蒸馏水反复浸泡清洗2-3次，直至其表面无酒精残留，然后，用无菌镊子取出孢蒴内的孢子并盛放至无菌水中，制成悬浮液；S2、制备无菌培养基：将0.5M的硫酸铵、3.3mgL2,4-D以及0.5mgLMn分别用100mL体积浓度为95％的酒精溶解，并分别加水定容至50ml，配置成硫酸铵溶液、2,4-D溶液以及Mn溶液，再配置数个WPM培养基，并向每个WPM培养基中等量添加25gL蔗糖、5gL琼脂、硫酸铵溶液、2,4-D溶液以及Mn溶液，加热溶解后，调节pH至5-6，灭菌，待温度降至室温，得到无菌培养基；S3、接种侧枝匐灯藓悬浮液：将步骤S2制备的数个无菌培养基均分为三份，首先，在无菌条件下，利用批量接种装置将步骤S1中制备的悬浮液同步接种到第一份的数个无菌培养基中，10d后获得第一代无菌配子体；S4、无菌配子体的大量繁殖及收集：利用批量接种装置将步骤S3中制备的第一代无菌配子体转接到步骤S2制备的第二份的数个无菌培养基中，10d后获得第二代无菌配子体，最后，将第二代无菌配子体切割成长0.3-0.4cm的切段，接种到步骤S2制备的第三份的数个无菌培养基上培养15d，每个第二代无菌配子体切段繁殖数量众多的侧枝匐灯藓。

全文数据：

权利要求：

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