申请/专利权人：华东理工大学

申请日：2022-11-25

公开（公告）日：2024-02-13

公开（公告）号：CN116004677B

主分类号：C12N15/60

分类号：C12N15/60;C12N15/31;C12N15/80;C12N9/88;C07K14/38;C07K14/37;C12N1/15;C12P7/46;C12R1/885

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.13#授权;2023.05.12#实质审查的生效;2023.04.25#公开

摘要：本发明公开了一种生产衣康酸的里氏木霉工程菌的构建方法及应用，属于生物工程领域。上述构建方法包括以下步骤：1以不产衣康酸的丝状真菌里氏木霉菌或者里氏木霉菌来源的衍生菌为出发菌株，导入编码顺式乌头酸脱羧酶和线粒体三羧酸转运蛋白的外源基因，获得菌株I；2过表达所述菌株I的内源膜转运蛋白，获取产衣康酸的里氏木霉工程菌。本发明通过基因改造获得里氏木霉工程菌，该工程菌能以葡萄糖、甘油、液化淀粉、纤维素、纤维素水解液等常见物质为碳源，直接发酵生产大量衣康酸，摇瓶发酵最高产量可达60gL。可见，本发明为微生物来源的衣康酸的生产提供了新的方法，可应用于衣康酸的工业化生产。

主权项：1.一种里氏木霉工程菌的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）以不产衣康酸的丝状真菌里氏木霉菌或者里氏木霉菌来源的衍生菌为出发菌株，导入编码顺式乌头酸脱羧酶和线粒体三羧酸转运蛋白的外源基因，获得菌株I；（2）过表达所述菌株I的内源膜转运蛋白，获取产衣康酸的里氏木霉工程菌；所述出发菌株为里氏木霉菌QM6a；所述顺式乌头酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，编码所述顺式乌头酸脱羧酶的基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述线粒体三羧酸转运蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示，编码所述线粒体三羧酸转运蛋白的基因的核苷酸序列如SEQIDNO.6所示；所述内源膜转运蛋白为mfs超家族转运蛋白；编码所述内源膜转运蛋白的基因为mfs1、mfs2、mfs3或mfs5，其核苷酸序列分别如SEQIDNO.10、SEQIDNO.11、SEQIDNO.12或SEQIDNO.14所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华东理工大学 一种生产衣康酸的里氏木霉工程菌的构建方法及应用

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