申请/专利权人：广州市达瑞生物技术股份有限公司

申请日：2020-11-23

公开（公告）日：2024-02-27

公开（公告）号：CN112608899B

主分类号：C12N5/09

分类号：C12N5/09

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.27#授权;2021.04.23#实质审查的生效;2021.04.06#公开

摘要：本发明公开了一种无血清培养基，包括基础培养基、血清白蛋白、ROCK抑制剂、B27、Heregulin、ActivinA、EGF、bFGF、烟酰胺、NEAA、TraceElementsA、TraceElementsB、TraceElementsC、2‑巯基乙醇。利用此无血清培养基建立了一种方便、快速、稳定的癌组织起源球状体的培养方法，优化原有培养方法中的培养基组成与制备方法，提供稳定可控的无血清培养方案，以解决现有三维培养方案中原代肿瘤细胞样本量不足、增殖作用有限的问题，为制备CTOS生物样本库以及为癌症患者进行个性化药物评估和筛选提供模型支持。

主权项：1.一种无血清培养基在癌组织起源球状体的培养中的应用，其特征在于，所述癌组织为直肠癌组织、乳腺癌组织和或胃癌组织；培养直肠癌组织和或乳腺癌组织，所述无血清培养基由基础培养基DMEMF12、牛血清白蛋白1.55%wv、ROCK抑制剂Y2763210μM、B2750×2%vv、Heregulin10ngml、ActivinA10ngml、EGF50ngml、bFGF8ngml、烟酰胺10mM、NEAA100×1%vv、TraceElementsA1000×0.1%vv、TraceElementsB1000×0.1%vv、TraceElementsC1000×0.1%vv、2-巯基乙醇0.1mM和Primocin100μgml组成；培养胃癌组织，所述无血清培养基由基础培养基DMEMF12、牛血清白蛋白1.55%wv、ROCK抑制剂Y2763210μM、B2750×2%vv、Heregulin10ngml、ActivinA10ngml、EGF50ngml、bFGF8ngml、烟酰胺10mM、NEAA100×1%vv、TraceElementsA1000×0.1%vv、TraceElementsB1000×0.1%vv、TraceElementsC1000×0.1%vv、2-巯基乙醇0.1mM、Primocin100μgml和GastrinI10ngml组成；所述癌组织起源球状体的培养方法为直肠癌组织、乳腺癌组织和或胃癌组织用DMEMF12和细胞分散酶消化处理后，通过孔径300μm的尼龙滤膜过滤，去除未消化完全的组织，收集细胞悬液，离心弃上清，细胞沉淀中加入无血清培养基，混合均匀，转移至包被有胶原凝胶溶液的培养容器中，或将其与胶原凝胶溶液混合均匀滴加于培养容器中培养，培养结束后，弃去培养基进行消化。

全文数据：

权利要求：

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