申请/专利权人：南昌大学

申请日：2023-12-04

公开（公告）日：2024-03-08

公开（公告）号：CN117660342A

主分类号：C12N5/079

分类号：C12N5/079

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.03.26#实质审查的生效;2024.03.08#公开

摘要：本发明提供了一种中华绒螯蟹神经组织外泌体提取纯化的方法，对现有的差速离心法进行改良。本发明首先通过差速离心去除细胞、细胞碎片、微泡和凋亡小体等高浮力密度的物质，然后通过超滤法进一步去除包括游离蛋白在内的小分子物质，最后通过超速离心法富集纯化外泌体样品。本发明能够快速高效地分离纯化中华绒螯蟹神经组织的外泌体，不需要繁琐的操作及任何提取试剂，成本低廉，且能在保证外泌体的生物活性不受影响的前提下处理大批量样品。为外泌体在水产动物中的的广泛应用提供了更多的可能。

主权项：1.一种中华绒螯蟹神经组织外泌体提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：将中华绒螯蟹神经组织剪碎置于胰蛋白酶消化液中，并进行冰上研磨后，在37℃摇床内以45rpm温浴裂解40-60min，制得细胞悬液；向细胞悬液中加入PMSF并使得所述PMSF的浓度为1mmolL，进行差速离心后收集上清液，使用0.22μm的滤膜对所述上清液进行过滤后收集滤液进行超滤，得浓缩液；向浓缩液中加入PBS重悬后，超速离心收集沉淀并重悬沉淀，制得提取纯化后的中华绒螯蟹神经组织外泌体。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南昌大学 一种中华绒螯蟹神经组织外泌体提取纯化方法

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