申请/专利权人：南京财经大学

申请日：2021-01-19

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN114813976B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/72;G01N30/86

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.15#授权;2022.08.16#实质审查的生效;2022.07.29#公开

摘要：本发明公开了一种草莓采后灰霉病早期快速检测的方法，该方法包括以下步骤：1选取大小相近且表面无损伤的草莓，无菌处理后，接种灰葡萄孢霉后贮藏于无菌恒温恒湿箱中，分别在贮藏发病0、24、48、72、96、120h后取样进行检测分析。2采用顶空自动进样，采集不同贮藏时间下GC‑IMS三维信号图谱，并统计微生物含量变化。3从多维度分析不同病害阶段的草莓果实气味指纹图谱差异。4对比筛查不同病害阶段样品在发病过程中产生特异挥发性物质GC‑IMS信号变化并分析。5结合动态主成分分析算法，实现无监督式草莓采后灰霉病快速检测。本发明可以实现草莓采后灰霉病无损检测，保障草莓果实产业的健康发展，为相关产业装备的研发提供技术支撑。

主权项：1.一种草莓采后灰霉病早期快速的检测方法，该方法包括以下步骤：1选取大小相近且表面无损伤的草莓，无菌处理后，接种灰葡萄孢霉后贮藏于无菌恒温恒湿箱中，分别在贮藏发病0、24、48、72、96、120h后取样进行检测和分析；其中无菌恒温恒湿箱的条件为20±1℃、85±5％；2采用顶空自动进样，采集不同贮藏时间下GC-IMS三维信号图谱，并统计不同时间段微生物含量变化；3分别从气相分离时间和离子迁移时间，多维度分析不同病害阶段的草莓果实GC-IMS气味指纹图谱差异；4对比筛查不同病害阶段样品在发病过程中产生特异挥发性物质GC-IMS信号变化，并定性分析；5结合动态主成分分析算法，基于不同病害过程草莓果实顶空GC-IMS信号差异，实现无监督式草莓采后灰霉病早期快速检测；步骤2中，采用顶空自动进样模式，直接进行GC-IMS指纹图谱采集；顶空进样的方法为取不同病害阶段的草莓，置于50mL的顶空瓶中，在40℃下孵育15min后进样，进样量为500μL；进样方式直接采用自动顶空进样，草莓果实完整放入50mL顶空瓶中，选用FSSE54-CB1色谱柱进行气相分离，分析时间为30min，色谱柱温度为60℃；气相色谱载气流速初始设为2mLmin，保持2min，随后18min内线性梯度上升至100mLmin；步骤3中，分别从GC-IMS采集数据的保留时间、迁移时间和峰强度，分别从三个维度方面直观了解不同病害时间草莓的挥发性有机组分差异；并结合NIST数据库和IMS数据库对不同病害阶段草莓采后挥发性成分进行定性分析，对比分析草莓感染灰霉病后挥发性成分的关键代谢通路；步骤4中差异性标志物的筛选方法为：采用偏最小二乘判别分析法，对步骤1测得的接种灰霉病的处理组与不接种灰霉病的处理组草莓果实中所有挥发性有机物进行分组和筛选，以差异度贡献值＞1的挥发性有机物作为差异性标志物。

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权利要求：

百度查询： 南京财经大学 一种草莓采后灰霉病早期快速检测的方法

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