申请/专利权人：北京康美天鸿生物科技有限公司;深圳康美生物科技股份有限公司

申请日：2023-02-28

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN116042929B

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.19#授权;2023.05.19#实质审查的生效;2023.05.02#公开

摘要：本发明属于医学检测领域，具体涉及检测引起发热出疹性疾病病毒的组合物。本发明的检测引起发热出疹性疾病病毒的组合物，包括用于检测猴痘病毒、天花病毒、单纯疱疹病毒I型、水痘‑带状疱疹病毒的引物和探针，其可检测上述四中病毒，外加一个人源内参基因，采用5色荧光PCR技术，设计为单管多通道检测产品。从而，本发明使用5色荧光技术，实现检测4种常见引物出疹疾病的病原体微生物，具体包括猴痘病毒、天花病毒、单纯疱疹病毒1型和水痘‑带状疱疹病毒，同时使用人源基因GAPDH作为内对照，对标本采集、运输、保存、提取和加样等全过程进行质量监控，具有特异性好、便于运输和保存的特点。

主权项：1.非疾病诊断目的的检测引起发热出疹性疾病病毒的方法，其特征在于，所述方法包括使用组合物进行荧光PCR扩增的步骤，所述组合物包括用于检测猴痘病毒、天花病毒、单纯疱疹病毒I型和水痘-带状疱疹病毒的引物和探针，其中，检测猴痘病毒的引物和探针为：SEQIDNO.1:5'-TAGAAAATGGAGCAAATGTCA-3'；SEQIDNO.2:5'-CTACGGGCGATGACAGAT-3'；SEQIDNO.3:5'-ACGCAGTAATGAGTAA-3'；检测天花病毒的引物和探针为：SEQIDNO.4:5'-AATATTATGAATGAGAGATACCTTAATGT-3'；SEQIDNO.5:5'-ACATTTTTTATCTGTGAAAACAGG-3'；SEQIDNO.6:5'-TGTGTCAAAAGTATACGA-3'；检测水痘-带状疱疹病毒株的引物和探针为：SEQIDNO.7:5'-GAGATTCACGAAGATTGCGG-3'；SEQIDNO.8:5'-CCTCCCAGCACGCTAACG-3'；SEQIDNO.9:5'-CGACTTTTATCTAATGGG-3'；检测单纯疱疹病毒I型的引物和探针为：SEQIDNO.10:5'-GTCTGGTGGTCGTAGGGTG-3'；SEQIDNO.11:5'-ATCTTGTGGGCGGGACT-3'；SEQIDNO.12:5'-TGTATCTGGCGTTCG-3'；所述组合物还包括人源内参基因GAPDH的引物和探针：SEQIDNO.13:5'-ATGGACACGCTCCCCTGAC-3'；SEQIDNO.14:5'-TGAGTCCTTCCACGATACCAAA-3'；SEQIDNO.15:5'-GCAATGCCTCCTGCACCACCAA-3'；所述探针的5’端标记荧光基团，3’端标记淬灭基团;所述荧光基团包括FAM、VIC、ROX、CY5和CY5.5；检测猴痘病毒、天花病毒、单纯疱疹病毒I型和水痘-带状疱疹病毒的探针所标记的荧光基团彼此互不相同且互不干扰；所述组合物还包括阳性对照、阴性对照，10×PCRBuffer、MgCl2、dUTPdNTPsMix、BSA、TaqDNA聚合酶、UDG酶和灭菌超纯水；所述PCR扩增步骤为：50℃2min；95℃3min；95℃10sec、60℃30sec，40个循环。

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