申请/专利权人：浙江鼎创医疗科技有限公司

申请日：2023-11-29

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117741165A

主分类号：G01N33/92

分类号：G01N33/92;G01N33/543;G01N33/558;G01N33/577;G01N33/532;G01N33/531;G01N33/58

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本发明提供了一种高特异性、高灵敏度HNL检测用胶体金免疫层析试纸条，包括PVC底板，PVC底板上依次设置有样品垫、金标垫、包被膜、吸水垫；样品垫和吸水垫分别设置在PVC底板的两端，金标垫的一端压在所述样品垫的下方，硝酸纤维素膜的两端分别压在金标垫以及吸水垫的下方；金标垫上包被有胶体金标记的中性粒细胞载脂蛋白单克隆抗体II抗体和小鼠IgG抗体混合物；包被膜包括硝酸纤维素膜以及设置在硝酸纤维素膜上的包被中性粒细胞载脂蛋白单克隆抗体Ⅰ抗体的检测线、包被羊抗鼠多克隆抗体的控制线。本发明还公开了试纸条的制备方法以及使用方法。本发明提供的试纸条测试精确度高，具有较低的最低检测限。

主权项：1.一种高特异性、高灵敏度HNL检测用胶体金免疫层析试纸条的制备方法，包括以下步骤:1制备胶体金溶液:以柠檬酸三钠作为还原剂制备粒径为30nm的胶体金溶液；2胶体金-抗体复合物的制备:采用K2CO3调节胶体金溶液的pH至8-8.5，采用重悬液将中性粒细胞载脂蛋白单克隆抗体II抗体稀释至0.5-1.5mgml，将稀释后的中性粒细胞载脂蛋白单克隆抗体II抗体溶液和胶体金溶液混合，摇床振荡5-15min后加入10wv％BSA溶液，继续摇床振荡15-25min，之后在4℃下进行一次低速离心处理，收集上清液，上清液继续在4℃下进行第二次高速离心处理，收集沉淀，得到的沉淀用重悬液重悬，得第一分散液，其OD值为36-40；采用K2CO3调节胶体金溶液的pH至8.5-9.2，采用重悬液将小鼠IgG抗体稀释至0.5-1.5mgml，将稀释后的小鼠IgG抗体溶液和胶体金溶液混合，摇床振荡5-15min后加入10wv％BSA溶液，继续摇床振荡15-25min，之后在4℃下进行一次低速离心处理，收集上清液，上清液继续在4℃下进行第二次高速离心处理，收集沉淀，得到的沉淀用重悬液重悬，得第二分散液，其OD值为27-28；将第一分散液和第二分散液混合，得胶体金-抗体复合物；3金标垫的制备:将聚酯膜放入由Na2HPO4·12H2O、BSA、TritonX-100、Proclin300组成的缓冲液中浸泡，之后取出干燥，得预处理聚酯膜；然后采用喷金仪将步骤2制得的胶体金-抗体复合物均匀喷涂在预处理聚酯膜上，然后进行干燥，得金标垫，采用铝箔袋密封干燥保存，备用；4样品垫的制备:将玻璃纤维膜放入由Na2B4O7·10H2O、BSA、NaCl、SDS-L、Proclin300、表面活性剂S9、Tween-20组成的缓冲液中浸泡，取出后干燥，得样品垫，铝箔袋密封干燥保存备用；5包被膜的制备:使用由Na2HPO4·12H2O、表面活性剂S9组成的包被液将中性粒细胞载脂蛋白单克隆抗体Ⅰ抗体稀释至0.5-1.5mgml，然后采用喷膜仪将中性粒细胞载脂蛋白单克隆抗体Ⅰ抗体稀释液在硝酸纤维素膜上划线，得检测线；采用包被液将抗鼠多克隆抗体稀释至0.5-1.5mgml，然后采用喷膜仪将抗鼠多克隆抗体稀释液在硝酸纤维素膜上划线，得控制线；6组装:将吸水垫、样品垫、硝酸纤维素膜、金标垫粘在PVC底板上，且硝酸纤维素膜的一端与吸水垫有部分重叠，所述金标垫的两端分别与样品垫、硝酸纤维素膜有部分重叠，然后切条组装。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江鼎创医疗科技有限公司 一种高特异性、高灵敏度HNL检测用胶体金免疫层析试纸条及其制备方法以及使用方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD