申请/专利权人：中国人民解放军海军军医大学

申请日：2023-11-09

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117737299A

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93

优先权：["20221214 CN 2022116053588"]

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本发明涉及分子生物技术领域，具体是提供一种基于微流控技术的蚊媒相关病原体检测方法，所述的蚊媒相关病原体为登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病毒和乙型脑炎病毒。本发明结合蚊媒相关登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病毒和乙型脑炎病毒检测的实际需求，研发了微流控芯片，该方法敏感性强，特异度高，所用试剂耗材均可常温保存，便于运输携带，尤其适合病原体现场的快速检测。

主权项：1.一种基于微流控技术的蚊媒相关病原体检测方法，其特征在于，所述的蚊媒相关病原体为登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病毒和乙型脑炎病毒；所述的检测方法包括以下步骤：A制备特异性引物和探针针对登革病毒、基孔肯雅病毒、黄热病毒和乙型脑炎病毒各筛选2条特异性引物和1条探针，探针5’使用FAM标记，3’使用TAMRA标记；核苷酸序列如下所示： B微流控芯片制备采用16孔芯片，设立4个阴性对照孔，样本检测12孔；共检测4种病原体，每种3孔，分为阳性对照1孔，样本检测2孔；将检测孔的检测试剂预混浓缩至2ul分装到对应的样本检测孔和阴性对照孔中；阳性对照孔的检测试剂预混浓缩至2ul分装到对应的阳性对照孔中；按照下列步骤进行干燥：0.15Mpa，-55℃持续4h，后每隔1h升高10℃，最后到15℃时回复常温常压；在260℃，5s条件下快速进行热键合封膜，将边缘多余封膜进行裁剪，完成芯片制备；C检测方法采用微流控芯片技术，将检测所需试剂预封装至对应孔中，使用时将提取好的病原体核酸注入芯片，放入微流控芯片检测仪中进行反应即可。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国人民解放军海军军医大学 一种基于微流控芯片技术的蚊媒相关病原体检测技术及应用

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