申请/专利权人：华中科技大学同济医学院附属同济医院

申请日：2023-11-13

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117737131A

主分类号：C12N15/861

分类号：C12N15/861;C07K14/705;C12N15/12

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种构建含气味分子9‑氧代‑2‑癸烯酸受体的真核表达腺病毒载体的方法及应用；所述方法包括：分别对含9‑氧代‑2‑癸烯酸受体的受体载体和腺相关病毒载体进行酶切，回收受体载体酶切片段和病毒载体酶切片段，并连接，后酶切和测序鉴定；对重组质粒载体进行质粒DNA扩增；采用脂质体法包装得到的质粒扩增产物，并转染目标细胞，后进行病毒的表达和浓缩纯化；对得到的腺病毒原液进行滴度检测，判断腺病毒的滴度是否符合使用标准；若是，则保存腺病毒原液，得到真核表达腺病毒载体；其中，受体载体和腺相关病毒载体的酶切位点相同；该方法所得的腺病毒载体表达出的腺病毒的纯度、安全性和有效性符合安全使用的标准。

主权项：1.一种构建含气味分子9-氧代-2-癸烯酸受体的真核表达腺病毒载体的方法，其特征在于，所述方法包括：分别对含9-氧代-2-癸烯酸受体的受体载体和腺相关病毒载体采用内切酶进行酶切，分别得到受体载体酶切片段和病毒载体酶切片段；回收所述受体载体酶切片段和所述病毒载体酶切片段，并进行连接，后进行酶切和测序鉴定，得到真核表达9-氧代-2-癸烯酸受体的重组质粒载体；对所述重组质粒载体进行质粒DNA扩增，得到质粒扩增产物；采用脂质体法包装所述质粒扩增产物，并转染目标细胞，后进行病毒的表达和浓缩纯化，得到含9-氧代-2-癸烯酸受体的腺病毒原液；对所述腺病毒原液进行滴度检测，判断腺病毒的滴度是否符合使用标准；若是，则保存所述腺病毒原液，得到含气味分子9-氧代-2-癸烯酸受体的真核表达腺病毒载体；其中，所述受体载体和所述腺相关病毒载体的酶切位点相同。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华中科技大学同济医学院附属同济医院 一种构建含气味分子9-氧代-2-癸烯酸受体的真核表达腺病毒载体的方法及应用

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