申请/专利权人：翌圣生物科技(上海)股份有限公司

申请日：2023-12-14

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117736969A

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.09#实质审查的生效;2024.03.22#公开

摘要：本发明公开了一种从小鼠内脏组织中分离制备单细胞悬液的方法，其步骤包括；预处理；将处理后的组织放入混合酶解离液中进行初步消化解离；对酶解产物进行机械吹打，离心弃上清；酶解产物加入胰蛋白酶进行二次消化解离；终止酶消化反应，对酶解产物进行机械吹打；酶解产物过细胞网筛并离心，获得细胞沉淀，清洗并重悬细胞沉淀，获得细胞悬液；细胞悬液中加入红细胞裂解液进行裂红；裂红产物过细胞网筛，离心，重悬获得单细胞悬液裂。本发明简化了制备流程，缩短了制备时间，可以获得高活性的单细胞悬液，悬液杂质少，污染低，非常适合高通量单细胞测序和细胞系的培养，为细胞生物学和功能基因组学研究奠定基础。

主权项：1.一种从小鼠内脏组织中分离制备单细胞悬液的方法，其特征在于其步骤包括：1对小鼠内脏组织进行预处理后，剪碎；2将处理后的组织放入混合酶解离液中进行初步消化解离；3对酶解产物进行机械吹打以分散未解离的组织块，离心弃上清；4酶解产物加入胰蛋白酶进行二次消化解离，主要是将未消化的组织块进行彻底解离；5终止酶消化反应，对酶解产物进行机械吹打以分散未解离的组织块；6酶解产物过细胞网筛并离心，获得细胞沉淀，清洗并重悬细胞沉淀，获得细胞悬液；7细胞悬液中加入红细胞裂解液进行裂红；8裂红产物过细胞网筛，离心，加入细胞清洗液清洗后，重悬获得单细胞悬液。

全文数据：

权利要求：

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