申请/专利权人：北京大学

申请日：2021-12-23

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN114414440B

主分类号：G01N15/01

分类号：G01N15/01;G01N21/64;C08F220/56;C08F222/38

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.22#授权;2022.05.20#实质审查的生效;2022.04.29#公开

摘要：本公开提供一种具有单细胞图案阵列的聚丙烯酰胺凝胶基底的制作方法，包括：制作表面具有单细胞微图案阵列的盖玻片；对培养皿底部的玻璃衬底进行亲水化处理；在亲水化处理后的培养皿中加入含有荧光颗粒的聚丙烯酰胺预聚液，采用所述表面具有单细胞微图案阵列的盖玻片压印所述聚丙烯酰胺预聚液，待聚丙烯酰胺溶液凝固后，得到含有人造散斑且具有单细胞图案阵列的聚丙烯酰胺凝胶基底。本公开通过微接触印刷技术在聚丙烯酰胺凝胶基底上实现单细胞图案阵列，制作出表面具有单细胞图案阵列的聚丙烯酰胺凝胶基底，该方法具备在单一装置中规则排列大量细胞的特点，制备简便易行，且一次成型，无需多余操作，为高通量单细胞力谱测试提供良好的基础。

主权项：1.一种具有单细胞图案阵列的聚丙烯酰胺凝胶基底的制作方法，其特征在于，该方法包括：制作表面具有单细胞微图案阵列的盖玻片；对培养皿底部的玻璃衬底进行亲水化处理；以及在亲水化处理后的培养皿中加入含有荧光颗粒的聚丙烯酰胺预聚液，采用所述表面具有单细胞微图案阵列的盖玻片压印所述聚丙烯酰胺预聚液，待聚丙烯酰胺溶液凝固后，得到含有人造散斑且具有单细胞图案阵列的聚丙烯酰胺凝胶基底；其中，所述对培养皿底部的玻璃衬底进行亲水化处理，包括：在培养皿底部的玻璃衬底上依次修饰羟基、氨基和醛基，将培养皿底部的玻璃衬底由疏水性变为亲水性；所述在培养皿底部的玻璃衬底上依次修饰羟基、氨基和醛基，采用的处理试剂分别为甲醇、3-氨丙基三乙氧基硅烷APTES和戊二醛；所述采用共聚焦培养皿，采用甲醇、3-氨丙基三乙氧基硅烷APTES和戊二醛对共聚焦培养皿底部的玻璃衬底进行亲水化处理，包括：将共聚焦培养皿用超声清洗，并冲洗干净，备用；将共聚焦培养皿用质量百分比为0.1％氢氧化钠溶液或甲醇浸泡5分钟以上，之后室温晾干；在共聚焦培养皿底部的玻璃衬底表面涂布一层亲和硅烷溶液，该亲和硅烷溶液为质量百分比1％-50％的3-甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷APTES丙酮溶液，丙酮挥发后，3-甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷覆盖在玻璃衬底表面，反应5-30分钟，使玻璃衬底接上氨基；双蒸水清洗2-4次，每次3-5分钟；加入体积浓度为0.5％戊二醛磷酸盐缓冲液，通风厨中放置30分钟，接上醛基；用双蒸水清洗，晾干即可。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 北京大学 具有单细胞图案阵列的聚丙烯酰胺凝胶基底的制作方法

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