申请/专利权人：中国肉类食品综合研究中心

申请日：2024-01-02

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117487745B

主分类号：C12N5/077

分类号：C12N5/077;A23L29/00;G01N33/569;C12Q1/02;G01N21/64

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.22#授权;2024.02.23#实质审查的生效;2024.02.02#公开

摘要：本发明公开了一种鸽子脂肪前体细胞的分离并体外培养方法及培养物和应用，涉及动物细胞提取技术领域，本发明提供的鸽子脂肪前体细胞的分离方法，为机械法联合胶原酶消化法，通过含20%胎牛血清的基础培养基DMEM终止消化从而控制消化时间，使得鸽子皮下脂肪肉糜能在目标范围内实现消化提取；可以在更简单和高效的条件下实现细胞培育肉用鸽子脂肪前体细胞的分离和体外培养，且无需离心，无需红细胞裂解液，步骤简单易操作，成本低；经细胞免疫荧光法鉴定可知本发明确实获得了鸽子脂肪前体细胞；经细胞分化鉴定可知获得的脂肪前体细胞分化效率高，分化均匀和稳定性好。

主权项：1.鸽子脂肪前体细胞的分离并体外培养方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将刚出壳鸽子的皮下脂肪剪成碎肉糜，加入碎肉糜3~5倍体积的胶原酶消化液，所述胶原酶为I型胶原酶，放置于37℃培养箱中，消化30~60min，每隔10~20min上下颠倒混匀一次；再加入胶原酶消化液8~10倍体积的含10~20%胎牛血清的基础培养基DMEM终止消化，用70~150μm的细胞筛过滤；（2）直接将过滤所得滤液铺至细胞培养皿，放置在培养箱中进行培养，培养温度为37~41℃；（3）培养2~3天，弃掉旧培养基，用PBS轻柔洗涤，然后加入含10~20%胎牛血清的基础培养基DMEM，即得到含脂肪前体细胞的培养物。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国肉类食品综合研究中心 鸽子脂肪前体细胞的分离并体外培养方法及培养物和应用

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