申请/专利权人：华中农业大学

申请日：2022-08-11

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN115369096B

主分类号：C12N7/02

分类号：C12N7/02;C12Q1/6806;C12Q1/70;C12R1/93

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.22#授权;2022.12.09#实质审查的生效;2022.11.22#公开

摘要：本发明属于水体中病毒浓缩和检测技术领域，具体涉及一种浓缩水中猪源性病毒的方法。本发明制备了一种有效吸附水中病毒的玻璃棉，以威胁养猪业和公共卫生安全的病原体伪狂犬病病毒和猪流行性腹泻病毒为模型评估了病毒核酸回收率；以沙门菌噬菌体ph2‑2为模型评估了病毒的感染性回收率。通过评估不同pH、不同水质、不同病毒类型等因素对浓缩效率的影响，最终确定了本发明的使用条件和最优操作程序。100L水体积经本发明浓缩后可将病毒浓度提高至1000‑10000倍以上。本发明对于完善养殖场疫病风险评估和公共卫生风险评估具有重要意义。

主权项：1.一种浓缩水中猪源性病毒的方法，所述的猪源性病毒为伪狂犬病毒，包括下列步骤：1制备玻璃棉过滤器，用0.5-1M的盐酸和氢氧化钠分别浸泡；2采样过滤：通过蠕动泵，以1-1.5Lmin速度抽取临床水样50-100L或更大体积，将水中病毒吸附到玻璃棉上；3洗脱病毒：将过滤器置于4℃条件下于48h内送到实验室，用pH9.0-10.0，浓度为3％的牛肉浸粉溶液浸泡15min后再冲洗保存，洗脱完成后加入盐酸将pH调整至中性以保持病毒活性；4洗脱液的浓缩：向上一步的洗脱液中加入1‰的脱脂奶粉，并将pH调整至5.0，在室温下以200rmin摇晃2h，离心30min后弃去上清，留取沉淀重悬；5若脱脂奶粉浓缩后的重悬液检测目的病毒核酸为阳性，使用超高速离心法对洗脱液进行浓缩，获得尽可能多的完整病毒粒子。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华中农业大学 一种浓缩水中猪源性病毒的方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD