申请/专利权人：翔宇药业股份有限公司

申请日：2023-12-28

公开（公告）日：2024-03-22

公开（公告）号：CN117467725B

主分类号：C12P19/38

分类号：C12P19/38;C12N1/14;C12R1/79

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.22#授权;2024.02.20#实质审查的生效;2024.01.30#公开

摘要：本发明公开一种高核苷含量的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉发酵生产工艺，属于微生物技术领域。本发明针对蝙蝠蛾拟青霉发酵产品核苷的含量相对较低，发酵周期长，发酵工艺复杂特点，开发一种高核苷含量的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉发酵生产工艺，本发明工艺步骤具体包括：菌株斜面接种培养、一级摇瓶种子培养、二级摇瓶种子培养、种子罐培养、发酵罐发酵和菌丝后处理。本发明所得产品，腺苷含量可到0.4%，腺苷、鸟苷以及尿苷总量可到1.72%，核苷含量有效提升，远高于市售产品。

主权项：1.一种高核苷含量的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉发酵生产工艺，其特征在于，工艺步骤包括：菌株斜面接种培养、一级摇瓶种子培养、二级摇瓶种子培养、种子罐培养、发酵罐发酵和菌丝后处理；工艺步骤具体为：1菌株斜面接种培养：将购买的菌株接种到斜面培养基中，经23-25℃培养7-8天至菌丝长满斜面，置于4℃保存；2一级摇瓶种子培养：将250mL一级摇瓶种子培养基装入500mL三角烧瓶，纱布封口，121℃，灭菌20分钟，放凉备用，用灼烧灭菌的接种钩挑取步骤（1）所得带菌琼脂块3块接入，纱布封口，23-25℃，130-180rmin培养4-7d，得到一级摇瓶种子液；3二级摇瓶种子培养：将250mL二级摇瓶种子培养基装入500mL三角烧瓶，纱布封口，121℃，灭菌20分钟，放凉备用，用灭菌枪头吸取10mL一级摇瓶种子液接入二级摇瓶培养基，23-25℃，130-180rmin培养4-7d，得到二级摇瓶种子液；4种子罐培养：将二级摇瓶种子液按照质量比1:80-160接入种子罐培养基中，通气量1.0-1.3vvm，罐压0.02-0.05MPa，温度20-25℃，pH自然，溶氧自然，发酵时间2-3天，得到种子罐发酵液；5发酵罐发酵：将种子罐发酵液转入发酵罐培养基中进行发酵，转种体积比例1：（7-15），通气量1.0-1.3vvm，罐压0.02-0.05MPa，温度20-25℃，pH自然，溶氧自然，发酵周期3-4天，pH值稳定或略有上升，再持续发酵时间65-72h、残糖0.9-1.2%，下发酵罐；6菌丝后处理：将步骤（5）所得物料用400-500目纱布过滤，65-75℃下干燥40-48h，控制物料含水量低于7%，研磨，过80目筛后得到终产品；步骤（1）所用菌株为蝙蝠蛾拟青霉（Paecilomyceshepiali），购自中国普通微生物菌种保藏中心，菌种编号为CGMCCNo.3.14870；步骤（1）斜面培养基的组成为：KH2PO41.0g，（NH4）2HPO41.5g，MgSO4·7H2O0.6g，ThiamineHCl500µg，琼脂粉15g，加水蒸馏水至1L灭菌倒平板；步骤（3）二级摇瓶种子培养基的组成为：麦麸提取液30-60%，葡萄糖2-3%，蛋白胨0.5%，KH2PO40.1%，MgSO40.03%，pH值自然，按质量百分比计；步骤（4）种子罐培养基的组成为：麦麸提取液30-60%，葡萄糖2-3%，氮源2-3.5%，KH2PO40.06%、MgSO4·7H2O0.04%，二甲硅油0.2-0.3%，余量为水，pH自然，按质量百分比计；所述氮源为蛋白胨和低温黄豆饼粉，两者质量比为2：5；所述麦麸提取液的制备方法为：将麦麸和水按照质量比1：（30-50）混合后进行超声波提取，超声频率为40-60kHz，超声时间为40-60min，超声温度为70-80℃，超声完成后用400-500目纱布过滤后得到；步骤（5）发酵罐培养基的组成为：葡萄糖2-3%，氮源2-3.5%，KH2PO40.06%、MgSO4·7H2O0.04%，二甲硅油0.2-0.3%，余量为水，pH自然，按质量百分比计；所述氮源为蛋白胨和低温黄豆饼粉，两者质量比为2：5。

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百度查询： 翔宇药业股份有限公司 一种高核苷含量的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉发酵生产工艺

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