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【发明公布】一种全悬浮细胞生产狐狸脑炎活疫苗的方法_玉林师范学院_202311805577.5 

申请/专利权人:玉林师范学院

申请日:2023-12-26

公开(公告)日:2024-03-29

公开(公告)号:CN117771356A

主分类号:A61K39/235

分类号:A61K39/235;A61K9/19;A61K47/42;A61K47/26;A61P31/14;C12N7/00;C12N5/071

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要:本发明属于疫苗生产技术领域,具体涉及一种全悬浮细胞生产狐狸脑炎活疫苗的方法,包括以下步骤:S1.细胞复苏;S2.10L反应器细胞培养;S3.100L反应器细胞培养;S4.1000L反应器细胞培养;S5.1000L反应器接毒培养;用1moLLNaOH碱液连接至细胞培养反应器补料口,按1:1的量补加接毒培养液,然后按总体积0.01%的量接入种毒继续培养至TCID50mL不低于107.0,收毒冷冻;S6.配苗冻干。本发明使用无血清全悬浮MDCK细胞培养技术生产狐狸脑炎活疫苗,通过从5L到1000L生物反应器的逐级放大生产,确保疫苗生产自动化、全密闭管道化。与现有生产技术相比,本发明的方法可进行大规模生产,缩短生产周期,自动化控制批间差异小、效价高、全密闭流体系统污染风险极低和不使用血清避免外源污染降低疫苗副反应等。

主权项:1.一种全悬浮细胞生产狐狸脑炎活疫苗的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.细胞复苏取工作细胞库细胞冻存管,迅速置于36.5-37.0℃水浴中,震荡使其完全融化;吸出细胞液至无菌离心管中,并添加培养基至10mL;1000rpm下离心5min,弃去离心上清液后吸取10mL培养基于离心管内,轻摇使细胞体重悬,然后将细胞悬液转移至125细胞培养瓶中,加入40mL培养基,转移至二氧化碳培养箱中培养;S2.10L反应器细胞培养将125细胞培养瓶中的细胞移种至10L反应器内培养;S3.100L反应器细胞培养将10L反应器内的细胞移种至100L反应器内并培养;S4.1000L反应器细胞培养将100L反应器内的细胞移种至1000L反应器内培养;S5.1000L反应器接毒培养用1moLLNaOH碱液连接至细胞培养反应器补料口,按1:1的量补加接毒培养液,然后按总体积0.01%的量接入种毒继续培养48-60h,收毒冷冻;S6.配苗冻干将病毒液融化后调整pH至7.4,于病毒液中加入保护剂,充分混合后定量分装,冷冻真空干燥,即得全悬浮细胞生产狐狸脑炎活疫苗。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 玉林师范学院 一种全悬浮细胞生产狐狸脑炎活疫苗的方法

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