申请/专利权人：海南大学;海南大学三亚研究院

申请日：2023-12-29

公开（公告）日：2024-03-29

公开（公告）号：CN117783506A

主分类号：G01N33/53

分类号：G01N33/53;G01N33/543;G01N21/65

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要：本发明涉及微囊藻毒素检测技术领域，尤其涉及一种MC‑LR毒素的双模态免疫检测方法。包括：合成MS@Au‑PtNZs，连接A23‑SBP重组抗体标签得到NZs@Ab；将NZs@Ab和含有MC‑LR的待测溶液混合孵育后磁分离，除去上清液，再加入碳酸盐包被缓冲液混合；将MC‑LR‑BSA固定在微孔板中，然后加入混合液，孵育后孔板上为MC‑LR和NZs@Ab结合的复合物，用洗涤缓冲液洗涤微孔板；加入3,3',5,5'‑四甲基联苯胺和H2O2溶液进行显色20～30min，然后加入终止液，检测吸光度；随后加入AuNPs溶液，孵育10～35min后检测SERS信号。优点在于检测灵敏度高、准确性好。

主权项：1.MC-LR毒素的双模态免疫检测方法，其特征在于，具体包括如下步骤：S1、合成磁性硅基功能纳米酶材料MS@Au-PtNZs：S2、磁性硅基功能纳米酶材料MS@Au-PtNZs连接A23-SBP重组抗体标签，得到NZs@Ab；S3、将NZs@Ab和待测溶液混合，在35～38℃、80～150rpm下孵育20～40min，然后磁分离、除去上清液，加入碳酸盐包被缓冲液，混合；S4、将微囊藻毒素-牛血清白蛋白偶联物MC-LR-BSA固定在微孔板中，用BSA封闭微孔板中未被固定的位点；S5、固定后加入步骤S3包被后的混合液，在35～38℃下共孵育1.5～2.5h，孵育完成后得到孔板上包被的MC-LR和NZs@Ab结合的复合物；用洗涤缓冲液洗涤微孔板；S6、加入3,3',5,5'-四甲基联苯胺和H2O2溶液显色反应20～30min，加入终止液终止反应，检测吸光度；S7、检测后，加入浓度为1～4mgmL的AuNPs溶液，10～35min后检测SERS信号；对测定的吸光度数据和SERS数据进行分析。

全文数据：

权利要求：

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