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【发明授权】一种紫椴种子的石蜡切片方法_北华大学_202011079054.3 

申请/专利权人:北华大学

申请日:2020-10-10

公开(公告)日:2024-03-29

公开(公告)号:CN112033723B

主分类号:G01N1/06

分类号:G01N1/06;G01N1/28;G01N1/30;G01N1/36

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.03.29#授权;2020.12.22#实质审查的生效;2020.12.04#公开

摘要:本发明提供了一种紫椴种子的石蜡切片方法,包括以下步骤:1切口;2固定;3脱水和透明;4浸蜡和包埋;5切片;6粘片;7染色;8封固得紫椴种子的石蜡切片。本发明制备的紫椴种子石蜡切片组织结构完整,不变形,种皮,胚乳细胞界限清晰,清晰可见种胚;可为研究紫椴种子萌发过程的结构特征、动态变化以及其他树种切片方法等提供理论和技术支撑,同时又因植物种子的形态结构、解剖学特征受其生长环境影响较大,亦可为其在分类、鉴定等方面提供依据;本发明方法操作简便,易于推广,可为制备具有致密种皮和不饱满种仁的种子切片提供技术支持。

主权项:1.一种紫椴种子的石蜡切片方法,其特征在于,包括以下步骤:1切口:在紫椴种子样本中部一侧纵向切开一个切口;所述切口的长度为种子纵向长度的12,深度为刺破果皮不伤及胚乳;2固定:将带切口的紫椴种子样本置于FAA固定液中固定24h;3脱水和透明:用乙醇洗脱紫椴种子样本中的固定液;之后用不同浓度乙醇对紫椴种子样本进行逐级脱水;再依次用无水乙醇-二甲苯混合溶液和二甲苯进行透明处理;4浸蜡和包埋:步骤3完成后,将紫椴种子样本和二甲苯转入鼓风干燥箱的蜡杯中,逐次添加石蜡碎屑直至饱和,形成二甲苯-石蜡糊状混合物;将鼓风干燥箱的温度升至56℃浸蜡处理,24h后打开蜡杯盖子蒸发去除二甲苯;再将鼓风干燥箱的温度升至65℃,用预热为熔融状的新石蜡替换蜡杯中原有石蜡,最后将石蜡和紫椴种子样本倒入纸盒中进行包埋;5切片:步骤4所得包埋后的紫椴种子样本经自然风干,切成10μm薄片;6粘片:用明胶粘贴剂将步骤5所述薄片固定在载玻片上;7染色:用二甲苯脱去切片上的石蜡,再用逐级降低浓度的乙醇对切片进行复水,最后用番红和固绿染色剂进行染色;8封固:将固封剂滴到切片中央,缓慢盖上盖玻片,自然风干,得紫椴种子的石蜡切片。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 北华大学 一种紫椴种子的石蜡切片方法

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