申请/专利权人:上海交通大学医学院附属第九人民医院
申请日:2022-11-03
公开(公告)日:2024-04-02
公开(公告)号:CN115581811B
主分类号:A61L27/38
分类号:A61L27/38;A61L27/24;A61L27/56;A61L27/50
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.02#授权;2023.01.31#实质审查的生效;2023.01.10#公开
摘要:本发明公开了一种自体组织工程活细胞睑板替代物及其制备方法和应用,涉及生物医学组织工程领域。本发明通过获取原代耳软骨进行扩增培养,可获得足量的自体耳软骨细胞,并进一步种植于I型胶原海绵支架上进行培养,最终得到本发明所述的睑板替代物。本发明通过一系列体内外实验证明了所述的睑板替代物具有高生物相容性和高稳定性,验证了其作为人睑板替代物的应用潜能;另外,本发明制备方法简单,来源易得,数量充足,有效避免了传统方法中自体移植的供区消耗和损伤,值得临床应用和推广。
主权项:1.一种自体组织工程活细胞睑板替代物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,获取患者来源的耳软骨,经抗生素消毒、清洗后,分离去除耳软骨表面的皮肤和软骨膜,剩余部分进一步处理为耳软骨碎片;S2,在步骤S1得到的耳软骨碎片中加入胶原酶进行消化处理6h或8h,得到软骨细胞悬液;S3,取步骤S2得到的软骨细胞悬液进行传代培养;所述传代培养的接种密度为5000个细胞cm2,传代培养基为DMEM+10%FBS+1~10ngmLTGF-β1+1~10ngmLFGF-2;S4,取传代至第2~3代的软骨细胞,以4×104个细胞cm3的密度种植于I型胶原海绵支架上,加入软骨培养基培养2~3周,形成基于胶原海绵支架的组织工程软骨,即所述的自体组织工程活细胞睑板替代物;其中,所述的软骨培养基的配方如下:DMEM培养基、胎牛血清10%、青霉素-链霉素-谷氨酰胺100UmL、N-2羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸10mM、丙酮酸钠10mM、重组人转化生长因子β310ngmL、胰岛素10μgmL、抗坏血酸2-磷酸三钠盐0.1mM;所述自体组织工程活细胞睑板替代物具有双层结构,用于制备眼睑缺损修复的医用产品。
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权利要求:
百度查询: 上海交通大学医学院附属第九人民医院 一种自体组织工程活细胞睑板替代物及其制备方法和应用
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