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【发明授权】用于马病毒性动脉炎病毒实时荧光RT-PCR检测的引物、探针、试剂盒、方法及其应用_广州海关技术中心_202111303332.3 

申请/专利权人:广州海关技术中心

申请日:2021-11-05

公开(公告)日:2024-04-02

公开(公告)号:CN114369684B

主分类号:C12Q1/70

分类号:C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.04.02#授权;2022.05.06#实质审查的生效;2022.04.19#公开

摘要:本发明公开了一种用于马病毒性动脉炎病毒实时荧光RT‑PCR检测的引物、探针、试剂盒、方法及其应用,涉及病毒检测技术领域,解决了现有技术中缺乏用于检测马病毒性动脉炎病毒核酸的荧光RT‑PCR检测方法的问题。本发明的两套引物和各自对应的探针既可独立用于检测马病毒性动脉炎病毒基因组RNA,也可同时用于检测马病毒性动脉炎病毒基因组RNA。本发明通过对基于上述引物和探针构建的反应体系和反应条件进行优化后,所建立的用于检测马病毒性动脉炎病毒基因组RNA的单重和多重实时荧光RT‑PCR检测方法具有扩增效率更高、特异性强、灵敏度高、操作简便、反应时间短等优点,本方法具有很好的重复性、稳定性,比普通RT‑PCR检测方法灵敏度至少高100倍。

主权项:1.一种用于马病毒性动脉炎病毒实时荧光RT-PCR检测的引物探针组合,其特征在于,包括如下引物:EVAF1:5’-GCCATTGAAGAGGCAAGTGTATTTA-3’;EVAF2:5’-GGTCGCTGATTGACGCATACTGGG-3’;EVAR3:5’-GTGCAAATCTAGCCCCGGGAAA-3’;EVAR4:5’-GTCACCTGGGCTCACATCAAAA-3’;所述引物的配对方式为:上游引物EVAF1、上游引物EVAF2、下游引物EVAR3和下游引物EVAR4同时使用;还包括如下探针:EVAP1:5’-TTCCACCGACCACGCGTCTGCTAAGC-3’;EVAP2:5’-CACCGTTTACGCGCTTCCCACCATATCTG-3’;所述探针分别采用荧光素标记探针序列的5’端,采用荧光淬灭基团标记探针序列的3’端。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 广州海关技术中心 用于马病毒性动脉炎病毒实时荧光RT-PCR检测的引物、探针、试剂盒、方法及其应用

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