申请/专利权人：江苏大学

申请日：2024-01-10

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN117849143A

主分类号：G01N27/327

分类号：G01N27/327;G01N27/30

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要：本发明属于生物传感器技术领域，具体涉及一种用于伏马菌素B1检测的光催化信号放大电化学生物传感器的制备方法及其应用。本发明合成复合材料氧化石墨炔‑亚甲基蓝‑金纳米棒作为基底材料同时产生电化学信号；单链DNA自组装制备DNA四面体纳米结构，通过控制碱基数目调整四面体尺寸，实现探针在电极表面可控组装；连接在DNA复合结构上的硒化镉量子点作为信号转导元件，通过降解亚甲基蓝实现伏马菌素B1诱导的电化学信号变化量的放大。本发明所构建的电化学适配体传感器用于伏马菌素B1的检测，灵敏度高、选择性好，其检测范围跨越5个数量级，检测限低至0.45fgmL‑1，取得了显著的效果。

主权项：1.一种用于伏马菌素B1检测的光催化信号放大电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：1金纳米棒溶液的制备：S1、首先将去离子水、溴化十六烷基三甲铵水溶液、氯金酸水溶液、硼氢化钠溶液混合，经搅拌后于一定温度条件下静置一段时间，得到金种子溶液；S2、将CTAB水溶液、HAuCl4水溶液、硝酸银水溶液、盐酸水溶液和抗坏血酸水溶液混合，然后加入金种子溶液，于一定温度条件下静置一段时间经离心、洗涤、复溶于去离子水中得到金纳米棒溶液，记为AuNRs溶液；2硒化镉量子点溶液的制备：S1、首先，将去离子水用氮气进行脱气处理，然后加入硒粉、硼氢化钠，静置一段时间，得到硒氢化钠前驱体溶液；S2、将去离子水用氮气进行脱气处理，然后在去离子水中加入CdCl2·2.5H2O，并在氮气气氛中搅拌，随后加入巯基己酸，得到混合液并调节pH后，继续在氮气气氛中搅拌一段时间，搅拌后加入步骤2的S1中制备的硒氢化钠前驱体溶液，所得混合溶液继续通氮气一段时间后于微波合成仪中反应，反应后得到淡黄色CdSeQDs原液；经离心、洗涤、干燥、复溶于去离子水中得到硒化镉量子点溶液，记为CdSeQDs溶液；3氧化石墨炔-亚甲基蓝-金纳米棒复合溶液的制备：将氧化石墨烯粉末分散于去离子水中，随后加入的亚甲基蓝溶液，震荡一段时间后加入步骤1制备的AuNRs溶液，继续震荡后，经离心、复溶于去离子水中得到氧化石墨炔-亚甲基蓝-金纳米棒复合溶液，记为GDYO-MB-AuNRs复合溶液；4DNA四面体纳米结构溶液的制备：取四种单链DNA固体，记为S1、S2、S3、S4，分别用TE缓冲液中溶解，得到四种TE溶解液；随后，将四种TE溶解液在TM缓冲液中稀释，得到四种TM稀释液，在TM稀释液中加入三2-羧乙基膦，得到四种单链DNA溶液；最后将四种单链DNA溶液按照等比例混合后的混合液进行加热反应，加热反应后再进行降温反应，反应后得到DNA四面体纳米结构溶液，记为TDN溶液；5DNA复合结构溶液的制备：取五种单链DNA固体，记为适配体、单链A、单链B、单链C、单链D，分别用TE缓冲液溶解，得到Apt溶液、单链A溶液、单链B溶液、单链C溶液和单链D溶液；然后再使用TM缓冲液稀释，得到Apt稀释液、单链A稀释液、单链B稀释液、单链C稀释液和单链D稀释液；最后将所得的五种稀释液等比例混合，然后进行加热反应，反应后可得到DNA复合结构溶液；6CdSeQDs-DNA复合结构溶液的合成：将含有N-3-二甲氨基丙基-N-乙基碳二亚胺盐化物和N-羟基琥珀酰亚胺的磷酸盐缓冲液加入到步骤2得到的CdSeQDs溶液中，室温下反应一段时间；随后，加入步骤5得到的DNA复合结构溶液静置一段时间，静置后离心取沉淀加入TM缓冲液复溶，得到CdSeQDs-DNA复合结构溶液；7玻碳电极的预处理：首先将玻碳电极用氧化铝在麂皮上抛光，然后分别在乙醇和超纯水中超声处理，得到预处理后的玻碳电极；8将步骤3制备的GDYO-MB-AuNRs复合溶液滴加到预处理后的玻碳电极表面，进行第一次孵育；之后滴加步骤4制备的TDN溶液，进行第二次孵育，并用PBS缓冲液进行清洗；随后将巯基己醇滴加在电极表面，在室温下封闭一段时间，以封闭金电极表面的非特异性活性位点；随后将CdSeQDs-DNA复合结构溶液滴加在电极表面，进行第三次孵育，孵育后得到电化学生物传感器。

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权利要求：

百度查询： 江苏大学 一种用于伏马菌素B1检测的光催化信号放大电化学生物传感器的制备方法及其应用

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