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【发明公布】光诱导介电泳虚拟通道技术筛选不同抗药性细胞的方法_长春理工大学_202311842663.3 

申请/专利权人:长春理工大学

申请日:2023-12-29

公开(公告)日:2024-04-09

公开(公告)号:CN117844757A

主分类号:C12N5/09

分类号:C12N5/09;G01N21/84;G01N21/01;C12M1/00;C12M1/36

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要:本发明公开了光诱导介电泳虚拟通道技术筛选不同抗药性细胞的方法,利用光诱导介电泳虚拟通道技术,根据不同抗药性水平的癌细胞药物处理后受到的光诱导介电泳力存在差异,从而实现将不同抗药性水平的癌细胞进行分选和分离。光诱导介电泳虚拟通道技术,利用PowerPoint软件设计光图案产生虚拟通道,并通过控制特定光图案的运行速度、信号发生器的频率和电压,改变施加在细胞上的光诱导介电泳力,最终达到采用虚拟通道分离不同抗药性水平癌细胞的目的。

主权项:1.光诱导介电泳虚拟通道技术筛选不同抗药性细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、设计光诱导介电泳微流控虚拟通道系统,主要包括:光诱导介电泳芯片、投影仪、光学显微镜、CCD相机、信号发生器、10×显微物镜、透镜、第一电脑、第二电脑;第一电脑与投影仪相连,通过在电脑上用PowerPoint软件制作虚拟通道图案并放映,投影仪将虚拟通道投递到光诱导芯片上;光诱导介电泳芯片上层为ITO层、下层为微流控虚拟通道层以及位于ITO层与微流控虚拟通道层之间的用于承载细胞溶液的密闭的细胞操纵空间,微流控系统的虚拟通道由一个主通道和多个副通道构成,主通道用来汇聚及运输细胞,副通道用来收集不同特性的癌细胞;信号发生器与光诱导介电泳芯片的ITO层和微流控虚拟通道层相连,通过改变其施加在芯片两端的电压和频率大小,从而实现不同抗药性癌细胞的分离和筛选;投影仪的作用主要用于确定细胞筛选过程的行走路径,以及投射出用于操纵细胞运动的较强光斑图案;细胞的行走路径通过PowerPoint软件提前在第一电脑上制备完成,其形状大小以及结构布局都由软件绘制完成;投影仪投射出的水平光图案通过反光镜反射到垂直方向上,将反光镜反射的光图案对准两个透镜和10×显微物镜进行聚集,聚集的光图案投射在光诱导介电泳芯片上,从而操纵细胞;光诱导介电泳芯片的上方依次是光学显微镜、CCD相机第二电脑与CCD相机相连,CCD相机接收到的图像在第二电脑中显示,用于实时观察光诱导介电泳芯片中细胞的分离情况;S2、选定目标癌细胞和抗癌药物,利用生物学方法筛选对癌细胞作用效果最佳的药物浓度及作用时间;用双面胶制作光诱导介电泳芯片可以承载细胞溶液的密闭空间,将特定浓度的抗癌药物与癌细胞作用一定时间,作用后的癌细胞溶液置于光诱导介电泳芯片内,打开投影装置并投射虚拟通道及操纵光斑,接通交流信号源,将细胞汇聚到光诱导介电泳虚拟通道入口处,为不同抗药性细胞的筛选及分离做好准备;S3、将特定浓度的抗癌药物与癌细胞作用一定时间,作用后的癌细胞溶液置于光诱导介电泳芯片内,打开投影装置并投射虚拟通道及操纵光斑,接通交流信号源,将细胞汇聚到光诱导介电泳虚拟通道入口处,为不同抗药性细胞的筛选及分离做好准备;S4、设置操纵光斑的运动速度,并沿着虚拟通道主通道运动,由于同一条件下具有不同耐药性的细胞受到的光诱导介电泳力不同,通过调节操纵光斑的运动速度以及施加在光诱导介电泳芯片上电场的大小,使不同抗药性细胞被分散到虚拟通道的各个副通道内,从而实现对不同抗药性细胞的分离和筛选;S5、最后通过原子力显微成像装置及荧光显微成像装置确定细胞分选和分离的准确性。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 长春理工大学 光诱导介电泳虚拟通道技术筛选不同抗药性细胞的方法

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