申请/专利权人：南昌大学

申请日：2023-12-29

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN117844910A

主分类号：C12Q1/686

分类号：C12Q1/686;C12N15/11

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要：本发明公开了一种基于尿嘧啶引物PCR的基因组步移方法，通过在随机引物（arbitrarywalkingprimer，AWP）3’端的倒数第二个位置引入了尿嘧啶碱基，并在二级UP‑PCR之前，使AWP序列在UNG的作用下被破坏，使得在二级UP‑PCR的热循环中，避免不需要的扩增子被扩增，仅两轮UP‑PCR就足以完成基因组步移任务，并获得足够的扩增特异性，相较传统的热不对称交错PCR、腕表PCR、桥接PCR等基因组步移方法更为简单易行，且具有同等的成功率。

主权项：1.一种基于尿嘧啶引物PCR的基因组步移引物，其特征在于，所述基因组步移反应的引物包括三个嵌套的SSP和三条AWP，分别为gadA-oSSP、gadA-mSSP、gadA-iSSP、gadR-oSSP、gadR-mSSP、gadR-iSSP、hyg-oSSP、hyg-mSSP、hyg-iSSP和AWP1、AWP2、AWP3；引物AWP和引物oSSP用于一级UP-PCR扩增反应，产物添加UNG处理后用于二级UP-PCR扩增反应；所述二级UP-PCR扩增反应引物包括引物AWP和引物mSSP；引物AWP和引物iSSP用于三级UP-PCR扩增反应，用于选择性富集目标产物。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南昌大学 一种基于尿嘧啶引物PCR的基因组步移方法

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