申请/专利权人：深圳市华健生物技术有限公司

申请日：2023-08-30

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN116942847B

主分类号：A61K47/69

分类号：A61K47/69;A61K47/60;A61K47/62;A61K36/9068;A61P17/00;A61K36/704;A61K36/537;A61K36/185

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.09#授权;2023.11.14#实质审查的生效;2023.10.27#公开

摘要：本发明提供了一种靶向毛囊的载药植物外泌体及其制备方法和应用，属于植物外泌体技术领域。本发明的靶向毛囊的载药植物外泌体的制备方法，包括如下步骤：1制备纳米级中草药悬浮液；2制备植物外泌体；3将所述纳米级中草药悬浮液与所述植物外泌体混合，得到负载药物的植物外泌体；4用Wnt3a蛋白修饰所述负载药物的植物外泌体，得到所述靶向毛囊的载药植物外泌体。本发明将纳米级中草药提取物包封在经稳定性修饰的植物外泌体中，再利用特异性毛囊细胞Wnt受体的靶向蛋白Wnt3a对外泌体进行修饰，构建药物纳米递送系统，使递送系统具有靶向性，提高药物的稳定性和生物利用率。

主权项：1.一种靶向毛囊的载药植物外泌体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1制备纳米级中草药悬浮液；所述纳米级中草药悬浮液的制备方法为将中草药粉末与水混合，均质，离心，重悬，得到纳米级中草药悬浮液；所述中草药粉末与水的体积比为1：8~15；所述均质的压力为5000~10000psi，温度为60~70℃，时间为30~180min；所述纳米级中草药悬浮液的浓度为10~1000mgml；2制备植物外泌体；所述植物外泌体为经过稳定性修饰的植物外泌体；所述稳定性修饰的方法为将植物外泌体依次进行脂肪酸修饰和聚乙二醇修饰；所述脂肪酸修饰的方法为将脂肪酸羧酸与所述植物外泌体溶液和PBS溶液混合，得到脂肪酸修饰的植物外泌体；所述脂肪酸羧酸的浓度为0.1~10mM，所述植物外泌体溶液与所述脂肪酸羧酸体积比为8~12：1；所述PBS溶液的添加量为所述植物外泌体溶液和所述脂肪酸羧酸总体积的0.5~2倍；所述聚乙二醇修饰的方法为将聚乙二醇-800与所述脂肪酸修饰的植物外泌体混合，得到植物外泌体交联体系；所述聚乙二醇-800的原始浓度为30~50％，所述植物外泌体交联体系中聚乙二醇-800的终浓度为1.3~2.5％；所述植物外泌体交联体系还加入海藻糖溶液，经超速离心后，重悬，得到所述经过稳定性修饰的植物外泌体；所述海藻糖溶液的原始浓度为20~30％；所述海藻糖加入植物外泌体交联体系后的终浓度为10~15％；3将所述纳米级中草药悬浮液与所述植物外泌体混合，得到负载药物的植物外泌体；4用Wnt3a蛋白修饰所述负载药物的植物外泌体，得到所述靶向毛囊的载药植物外泌体；所述用Wnt3a蛋白修饰的方法为：制备Wnt3a蛋白溶液，将所述负载药物的植物外泌体与Wnt3a蛋白溶液混合，洗涤，重悬，得到靶向毛囊的载药植物外泌体。

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