申请/专利权人：中国农业科学院生物技术研究所

申请日：2023-12-26

公开（公告）日：2024-04-05

公开（公告）号：CN117825589A

主分类号：G01N30/06

分类号：G01N30/06;G01N30/34;G01N30/60;G01N30/72

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.23#实质审查的生效;2024.04.05#公开

摘要：本发明公开了液相色谱‑质谱法或液相色谱法检测RNA中N1‑甲基‑假尿苷修饰丰度的方法。液相色谱‑质谱法检测RNA中N1‑甲基‑假尿苷修饰丰度的方法包括如下步骤：S1、提取生物样本的RNA，进行单核苷酸制备，再去磷酸化，纯化单核苷酸，得到上机样本；S2、进行液相色谱‑质谱法检测，采用外标法对所述上机样本中的N1‑甲基‑假尿苷含量和尿嘧啶核糖核苷含量分别进行定量，以N1‑甲基‑假尿苷含量除以尿嘧啶核糖核苷含量，获得所述生物样本的RNA中N1‑甲基‑假尿苷修饰丰度。本发明首次在RNA上准确检测出了N1‑甲基‑假尿苷，并且准确定量了植物中N1‑甲基‑假尿苷修饰丰度。

主权项：1.液相色谱-质谱法检测RNA中N1-甲基-假尿苷修饰丰度的方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、提取生物样本的RNA，进行单核苷酸制备，进一步去磷酸化，然后纯化单核苷酸，得到上机样本；S2、进行液相色谱-质谱法检测，采用外标法对所述上机样本中的N1-甲基-假尿苷含量和尿嘧啶核糖核苷含量分别进行定量，以N1-甲基-假尿苷含量除以尿嘧啶核糖核苷含量，获得所述生物样本的RNA中N1-甲基-假尿苷核苷修饰丰度；所述N1-甲基-假尿苷含量根据在碰撞能量为5V，mz为259.2-223的离子峰、碰撞能量为10V，mz为259.2-138.9的离子峰和碰撞能量为25V，mz为259.2-95.9的离子峰对应的色谱峰进行定量；所述尿嘧啶核糖核苷含量根据在碰撞能量为35V，mz为245.1-69.9的离子峰对应的色谱峰进行定量。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业科学院生物技术研究所 液相色谱-质谱法或液相色谱法检测RNA中N1-甲基-假尿苷修饰丰度的方法

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