申请/专利权人：浙江理工大学

申请日：2021-04-13

公开（公告）日：2024-04-05

公开（公告）号：CN113063953B

主分类号：G01N33/68

分类号：G01N33/68;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/532

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.05#授权;2021.07.20#实质审查的生效;2021.07.02#公开

摘要：本发明涉及文物检测技术领域，本发明公开了一种快速检测文物中动物胶原蛋白粘合剂的胶体金免疫层析试纸条的制备方法，包括：1）制备胶体金溶液；2）取牛胶原蛋白抗体用PBS缓冲液稀释；3）将牛胶原蛋白抗体溶液滴加至胶体金溶液中搅拌；4）加入BSA溶液，搅拌；5）加入PEG‑20000溶液，搅拌；6）离心处理，弃上清液；7）沉淀物用含BSA、叠氮钠溶液的PBS缓冲液重悬；8）用喷金划膜机将胶体金标记的抗体喷涂到金标垫上，制备金标垫；9）用喷金划膜机将牛胶原蛋白抗原和质控线抗体划到硝酸纤维素膜上形成检测线和质控线；10）组装成胶体金免疫层析试纸条。本发明的试纸条检测方法简单快速，可以用于考古现场的快速检测。

主权项：1.一种快速检测文物中动物胶原蛋白粘合剂的胶体金免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）取超声后分散均匀的胶体金8-12ml，加入碳酸钾溶液调节pH为8.0~9.0；2）取牛胶原蛋白抗体用PBS缓冲液稀释至浓度为10~20ugml；3）将所得牛胶原蛋白抗体溶液以25-35滴min的速度滴加至步骤1）所得胶体金溶液中，室温匀速搅拌45~60min；4）向步骤3）所得溶液中加入浓度为8-12wt%的BSA溶液至其终浓度为0.3-0.5wt%，进行蛋白的封闭，继续搅拌5-15min；5）向步骤4）所得溶液中加入浓度为8-12wt%的PEG-20000溶液至终浓度为0.15-0.25wt%，继续搅拌5-15min；6）将步骤5）所得溶液离心处理，弃上清液；7）沉淀物用含0.8-1.2wt%BSA、0.03-0.05wt%叠氮钠溶液的PBS缓冲液重悬进行防腐处理，冷藏备用；8）用喷金划膜机将步骤7）所得胶体金标记的抗体喷涂到金标垫上，制备金标垫；9）用喷金划膜机将牛胶原蛋白抗原和质控线抗体划到硝酸纤维素膜上形成检测线和质控线；10）组装成胶体金免疫层析试纸条；所述检测线中牛胶原蛋白抗原的浓度为1~2mgml，胶体金标记的抗体浓度为15~30ugml，质控线中牛胶原蛋白抗体浓度为1~2mgml。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江理工大学 一种快速检测文物中动物胶原蛋白粘合剂的胶体金免疫层析试纸条的制备方法

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