申请/专利权人：楷拓生物科技(苏州)有限公司;武汉楷拓生物科技有限公司;上海楷拓生物科技有限公司

申请日：2023-12-28

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117866947A

主分类号：C12N15/10

分类号：C12N15/10;C12N15/70;C12M1/02;C12M1/33;C12M1/00;C12R1/19

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明涉及一种大肠杆菌碱裂解过程中降低基因组DNA污染的方法和应用，包括使大肠杆菌菌体进行搅拌重悬获得菌悬液；将菌悬液和碱液分别输送至第一静态混合器进行混合，再进入盘管中进行裂解，得到菌体裂解液；将菌体裂解液和中和液分别输送至第二静态混合器中进行中和，得到裂解中和液；将裂解中和液进行静置、过滤得到质粒粗纯样品；使进入第一静态混合器的第一流体的流速与其截面积的比例为0.8～1.5Lmin：1cm2；使进入第二静态混合器的第二流体的流速与其截面积的比例为0.8～1.5Lmin：1cm2。本发明的方法实现菌悬液与碱液、菌体裂解液与中和液之间的低剪切且充分的混合，避免了混合不充分引起的质粒裂解回收率低，以及高剪切力造成的基因组DNA污染的问题。

主权项：1.一种大肠杆菌碱裂解过程中降低基因组DNA污染的方法，包括使大肠杆菌菌体进行重悬获得菌悬液的步骤，其特征在于：所述方法还包括以下步骤：1将所述菌悬液和碱液分别输送至第一静态混合器进行混合，再进入盘管中进行裂解，得到菌体裂解液；2将所述菌体裂解液和中和液分别输送至第二静态混合器中进行中和，得到裂解中和液；3将所述裂解中和液进行静置、过滤得到质粒粗纯样品；使进入所述第一静态混合器的第一流体的流速与所述第一静态混合器的截面积的比例为0.8～1.5Lmin：1cm2，所述第一流体为所述菌悬液和碱液的混合液；使进入所述第二静态混合器的第二流体的流速与所述第二静态混合器的截面积的比例为0.8～1.5Lmin：1cm2，所述第二流体为菌体裂解液和中和液的混合液。

全文数据：

权利要求：

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