申请/专利权人：吉林大学

申请日：2024-02-28

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117866941A

主分类号：C12N11/14

分类号：C12N11/14;C12N9/42

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：一种以氨基化树枝状介孔二氧化硅为载体的固定化纤维素酶，属于酶固定化技术领域。本发明是以氨基化树枝状介孔二氧化硅纳米为载体，吸附纤维素酶制得固定化纤维素酶Cellulase@ADMSNs。制备过程中，利用三乙胺调控介孔二氧化硅纳米材料的结构，得到孔径均一、尺寸为190～210nm、孔隙为10～25nm的树枝状介孔二氧化硅纳米材料，该材料具有树枝状皱襞孔隙，其大小与纤维素酶分子大小相似，载体上面的氨基与酶分子上的羧基结合，而不影响酶的活性位点，使固定化酶保持较高的活性和较高的重复使用性。与有关报道的固定化纤维素酶相比，活性显著增加，极大降低了工业生产纤维素酶使用成本。

主权项：1.一种以氨基化树枝状介孔二氧化硅为载体的固定化纤维素酶，其是由如下步骤制备得到：1树枝状介孔二氧化硅纳米材料的制备：将0.68g三乙胺溶于15～30mL超纯水，75～85℃下水浴25～35min；然后加入0.38g十六烷基三甲基溴化铵和0.16g水杨酸钠，75～85℃下水浴25～35min；再加入4mL体积分数98％的正硅酸乙酯，75～85℃下水浴1.5～2.5h；降至室温后离心，沉淀用超纯水和乙醇洗涤后干燥，经萃取去除模板剂，得到树枝状介孔二氧化硅纳米材料，记为DMSNs；2氨基化树枝状介孔二氧化硅纳米载体的制备：将0.3～0.5g步骤1制备的DMSNs加到60～100mL甲苯中，加热至澄清后再加入0.3～0.5mL的3-氨基丙基三乙氧基硅烷，DMSNs与3-氨基丙基三乙氧基硅烷的用量比例为1g：1mL，加热回流3～5h，降至室温后离心，沉淀用甲苯清洗，干燥后研磨得到氨基化树枝状介孔二氧化硅纳米载体，记为ADMSNs；3固定纤维素酶：取10mg步骤2得到的ADMSNs，加入到10mL浓度为0.1～0.6mgmL的纤维素酶溶液中；然后在转速为150～200rmin、4℃的水浴磁力搅拌器上搅拌4～12h，6000～10000rpm离心2～5min后所得沉淀用50mM的pH＝5.0乙酸-乙酸钠缓冲液洗涤后冻干，得到以氨基化树枝状介孔二氧化硅纳米材料为载体的固定化纤维素酶，记为Cellulase@ADMSNs。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 吉林大学 一种以氨基化树枝状介孔二氧化硅为载体的固定化纤维素酶

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