申请/专利权人：甘肃农业大学

申请日：2022-03-01

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN114813288B

主分类号：G01N1/30

分类号：G01N1/30;G01N1/36;G01N1/28;G01N1/06

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.12#授权;2022.08.16#实质审查的生效;2022.07.29#公开

摘要：本发明提供一种植物根系活性氧快速染色定位方法，包括以下步骤：1将植物根系固定到容器底部，添加待测活性氧对应的染色液没过样品，放入真空容器中，进行低温真空染色；2丢弃染色液，加入固定液，放入真空容器中，进行低温真空固定；3丢弃固定液，加入甘油水溶液，放入真空容器中，进行低温真空填充定形；4将冷室及切片刀具预冷，将丢弃甘油水溶液的植物根系使用OTC包埋剂进行包埋，调整固定台温度，进行切片；5植物根系回温后封片。本发明方法节约了大量制作时间，实现了快速切片；减少了温度对活性氧代谢的影响，极大提高了切片的准确性；能够保证组织不会收缩，保持原有的生活形态，保证了切片的真实可靠。

主权项：1.一种植物根系活性氧快速染色定位方法，所述植物为枸杞，其特征在于：所述方法包括以下步骤：（1）将植物根系固定到容器底部，添加待测活性氧对应的染色液没过样品，放入真空容器中，进行低温真空染色；（2）丢弃染色液，使用缓冲液冲洗数次样品，洗净残留染色液后加入固定液，放入真空容器中，进行低温真空固定；当检测O2-时，所述缓冲液为5mmolLpH7.6的3-n-吗啉丙烷磺酸钠缓冲液，当检测H2O2时，所述缓冲液为100mmolLpH6.9的磷酸钾缓冲液；（3）丢弃固定液，加入甘油水溶液，放入真空容器中，进行低温真空填充定形；（4）将冷室及切片刀具预冷至-18℃到-21℃，将丢弃甘油水溶液的植物根系使用OTC包埋剂进行包埋，调整固定台温度为-18℃至-19℃，进行切片；（5）植物根系回温后封片；步骤（1）-步骤（3）中，所述染色液、固定液、甘油水溶液在使用前预冷至0-4℃；步骤（1）-步骤（3）中，所述低温真空具体为：将真空容器预冷至0-4℃，使用时抽真空至真空度-0.05MPa以下。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 甘肃农业大学 一种植物根系活性氧快速染色定位方法

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