申请/专利权人：北京贝康医学检验所有限公司

申请日：2022-06-24

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN115058386B

主分类号：C12N5/073

分类号：C12N5/073;C12Q1/02;C12Q1/6883;C12Q1/6837

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.12#授权;2022.10.04#实质审查的生效;2022.09.16#公开

摘要：本申请涉及一种去除血性羊水中母血细胞污染的羊水细胞培养方法及应用。所述方法包括以下步骤：S1，将固液分离后的血性羊水中的上清去除后与羊水培养液混合，获得细胞悬液；将所述细胞悬液接种至培养皿中进行培养，获得第一培养物；S2，在所述第一培养物中添加所述羊水培养液继续进行培养，获得第二培养物；S3，去除第二培养物中的母血细胞和原有培养液，然后在其中添加所述羊水培养液，继续进行培养，获得第三培养物；S4，对所述第三培养物进行传代培养，获得传代培养物；S5，收集传代培养物中的胎儿细胞。该方法能够有效去除血性羊水中母血细胞，排除外来污染，保证后续检测结果的可靠性和准确性。

主权项：1.一种去除血性羊水中母血细胞污染的羊水细胞培养方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1，将固液分离后的血性羊水中的上清去除后与羊水培养液混合，获得细胞悬液；将所述细胞悬液接种至培养皿中进行培养，获得第一培养物；S2，在所述第一培养物中添加所述羊水培养液继续进行培养，获得第二培养物；S3，去除第二培养物中的母血细胞和原有培养液，然后在其中添加所述羊水培养液，继续进行培养，获得第三培养物；S4，对所述第三培养物进行传代培养，获得传代培养物；S5，收集传代培养物中的胎儿细胞；步骤S1中，所述血性羊水与羊水培养液的体积比为10～15:1；所述细胞悬液的接种量为0.5～1mL；步骤S1中，所述培养的条件为：温度37±2℃，CO2的体积浓度4～5％，时间12～18h；步骤S2中，所述羊水培养液的添加量为1.5～2.5mL；所述培养的条件为：温度37±2℃，CO2的体积浓度4～5％，时间24～48h；步骤S3中，去除第二培养物中的母血细胞和原有培养液的方式为：轻轻摇晃培养皿20～30次，使沉淀的母血细胞漂浮，用移液管吸出原有培养液，吸出时，用原有培养液沿玻片由上至下冲洗几次，以使母血细胞去除干净。

全文数据：

权利要求：

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