申请/专利权人:上海明捷医药科技有限公司
申请日:2023-12-27
公开(公告)日:2024-04-16
公开(公告)号:CN117890502A
主分类号:G01N30/02
分类号:G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/72
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.05.03#实质审查的生效;2024.04.16#公开
摘要:本发明属于α‑乳清蛋白技术领域,具体涉及测定乳糖中α‑乳清蛋白含量的方法。包括步骤:制备α‑乳清蛋白溶液为对照品储备液一;将对照品储备液一稀释为对照品储备液二;取对照品储备液二,稀释至不同的终浓度后置超滤管中,离心置膜上,取膜上溶液,超高效液相色谱‑串联QExactivePlus高分辨质谱法检测;取乳糖加热溶解,恢复至室温后吸取溶液离心,置膜上,溶解,取膜上溶液为供试品溶液;供试品加标溶液:取乳糖加热溶解,恢复至室温后,加入对照品储备液二,混匀后吸取溶液,离心置膜上,取膜上溶液为供试品加标溶液;超高效液相色谱‑串联QExactivePlus高分辨质谱法检测。本发明简便易行、灵敏度高。
主权项:1.测定乳糖中α-乳清蛋白含量的方法,其特征在于,该方法基于超滤前处理-超高效液相色谱-串联QExactivePlus高分辨质谱法,包括如下步骤:制备对照品储备液:称取α-乳清蛋白后溶解,得到α-乳清蛋白溶液,得到对照品储备液一;将所述对照品储备液一稀释为对照品储备液二,将所述对照品储备液二稀释成对照品储备液三;制备线性验证溶液:取不同体积的所述对照品储备液二,稀释至不同的终浓度后,分别精密吸取溶液置超滤管中,离心,置膜上,取膜上溶液即得线性验证溶液,通过超高效液相色谱-串联QExactivePlus高分辨质谱法检测线性验证溶液,以质谱峰面积为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线并得回归方程;进行准确性和重现性试验:制备供试品溶液:称取乳糖置离心管,加热溶解,恢复至室温后吸取溶液置超滤管中,离心,置膜上,溶解,取膜上溶液即得作为供试品溶液;供试品加标溶液:称取乳糖置离心管,加热溶解,恢复至室温后,加入所述对照品储备液二,混匀后吸取溶液置超滤管中,离心,置膜上,取膜上溶液即得作为供试品加标溶液;通过超高效液相色谱-串联QExactivePlus高分辨质谱法检测所述供试品溶液和供试品加标溶液,按单点对照法计算结果。
全文数据:
权利要求:
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