申请/专利权人：山西省中医药研究院(山西省中医院)

申请日：2021-11-16

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN114015649B

主分类号：C12N5/0775

分类号：C12N5/0775;A61K35/28;A61P9/10

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.16#授权;2022.02.25#实质审查的生效;2022.02.08#公开

摘要：本发明属中药以及生物技术领域，提供一种丹参饮刺激的骨髓间充质干细胞外泌体及其制备方法和应用。该外泌体为丹参饮水提取物诱导处理的骨髓间充质干细胞外泌体。通过SD大鼠心肌梗死模型，从宏观和微观水平评价丹参饮水提取物诱导处理的骨髓间充质干细胞外泌体对心肌梗死的治疗效果。通过心肌注射治疗，结果显示：血清心肌酶含量升高；心肌梗死面积降低；细胞排列紊乱、心肌细胞坏死、炎细胞浸润及纤维增生减轻；心肌细胞内线粒体肿胀减轻，线粒体嵴数量增加；CleavedCaspase‑3、p‑GSK‑3β表达及BaxBcl‑2比值降低；p62、LC3表达提高，提示可通过抑制心肌细胞凋亡、提高自噬水平，发挥抗心肌梗死的作用。

主权项：1.一种丹参饮刺激的骨髓间充质干细胞外泌体，其特征在于：所述外泌体为丹参饮水提取物诱导处理的骨髓间充质干细胞外泌体；具体制备方法为：（1）制备丹参饮水提取物即DYS提取物：丹参30g、檀香5g、砂仁5g加8倍水浸泡30min，先将丹参煎煮50min，后加入檀香、砂仁，再煎煮10min，过滤，药渣继续加6倍水煎煮，共煮3次，收取煎煮液，浓缩蒸干，密封后4℃备用；（2）收集骨髓间充质干细胞BM-MSCs：利用DMEM:F12完全培养基培养大鼠骨髓间充质干细胞BM-MSCs，BM-MSCs接种于培养瓶内，37℃、5%CO2培养，24h后首次换液，弃去红细胞及未贴壁细胞，7~10d后传代，得到间充质干细胞BM-MSCs；（3）制备丹参饮刺激的骨髓间充质干细胞外泌体BM-MSCsDSY-exos：步骤（2）所制备的BM-MSCs用含有浓度0.16gLDSY提取物的DMEM:F12完全培养基诱导3d，弃去培养基，PBS清洗3次，然后加入DSY提取物浓度为0.16gL的DMEM:F12无血清培养基，37℃、5%CO2培养24h后收集上清；将上清液2000g×10min、12000g×30min离心后，0.22um滤器滤去细胞碎片，滤液110000g×1h超高速离心，弃去上清、PBS重悬，重复110000g×1h超高速离心，弃去上清，保留BM-MSCs-exos，PBS重悬，-80℃保存备用；所述DMEM:F12完全培养基和溶解有浓度0.16gLDSY提取物的DMEM:F12无血清培养基，现用现配。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山西省中医药研究院(山西省中医院) 一种丹参饮刺激的骨髓间充质干细胞外泌体及其制备方法和应用

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD