申请/专利权人:修实生物医药(南通)有限公司
申请日:2024-01-26
公开(公告)日:2024-04-19
公开(公告)号:CN117904062A
主分类号:C12N9/00
分类号:C12N9/00;C12N15/52;C12N1/21;C12N15/70;C12P21/02;C07K14/435;C12R1/19
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.05.07#实质审查的生效;2024.04.19#公开
摘要:本发明提供高效引入2‑羟基庚酸的氨酰tRNA合成酶及其应用,所述氨酰tRNA合成酶突变体由如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列在第346、348、384、401、417位点突变所得。本发明的氨酰tRNA合成酶突变体在MmPylRS活性位点的对应位置进行突变,改变其底物特异性,使其能够识别2‑羟基庚酸,将2‑羟基庚酸与配对的tRNA相连,经核糖体转录翻译,插入目标蛋白基因的特定位点,从而达到对2‑羟基庚酸遗传编码的目的,这对基础研究以及工业生产都至关重要;并且氨酰tRNA合成酶突变体将对2‑羟基庚酸的引入效率提高了15.88~30.92倍。
主权项:1.氨酰tRNA合成酶突变体,其特征在于,由SEQIDNO.1所示的氨基酸序列突变所得,具体突变为以下任意一种:1346位的天冬酰胺N突变为蛋氨酸M,348位的半胱氨酸C突变为色氨酸W,且384位的酪氨酸Y突变为苯丙氨酸F;2346位的天冬酰胺N突变为蛋氨酸M,348位的半胱氨酸C突变为色氨酸W,384位的酪氨酸Y突变为苯丙氨酸F,且401位的缬氨酸V突变为丙氨酸A;3346位的天冬酰胺N突变为蛋氨酸M,348位的半胱氨酸C突变为色氨酸W,384位的酪氨酸Y突变为苯丙氨酸F,且401位的缬氨酸V突变为赖氨酸K;4346位的天冬酰胺N突变为蛋氨酸M,348位的半胱氨酸C突变为色氨酸W,384位的酪氨酸Y突变为苯丙氨酸F,且417位的色氨酸W突变为组氨酸H;5346位的天冬酰胺N突变为蛋氨酸M,348位的半胱氨酸C突变为色氨酸W,384位的酪氨酸Y突变为苯丙氨酸F,401位的缬氨酸V突变为丙氨酸A,且417位的色氨酸W突变为组氨酸H。
全文数据:
权利要求:
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